微卫星-又称短串联重复序列、简单重复序列,微卫星序列定位于基因的启动子.docxVIP

微卫星(microsatellite，MS)-又称短串联重复序列、简单重复序列，微卫星序列定位于基因的启动子 微卫星(microsatellite，MS)-又称短串联重复序列、简单重复序列，微卫星序列定位于基因的启动子、基因编码区、内含子及其与外显子交界区，与许多重要基因紧密连锁。通常由1-6个核苷酸组成，具有高度多态性，广泛存在于真核生物基因组中，约占真核基因组的5%。 ? 10株人癌细胞基因组的微卫星不稳定性特征 石中正1，2，刘?燕1，罗?敏1，陈英杰2，周轶平1(1昆明医科大学药学院暨省天然药物药理重点实验室，云南省昆明市?650500；2昆明医科大学基础医学院，云南省昆明市?650500) ?文章亮点： 人类基因组中，微卫星的数量庞大，且具有多态性，要确定肿瘤细胞株微卫星的稳定性情况，需要与癌旁正常组织对照，而目前已无法找到肿瘤细胞株建系时的癌旁正常组织。实验利用文献报道的5个几近单态性的微卫星位点，以正常细胞株为对照，克服了这一难题，测试了10株肿瘤细胞株的微卫星不稳定性情况，很多细胞株微卫星不稳定性情况属于首次报道，具有较强的创新性。 关键词： 组织构建；组织工程；人癌组织细胞；微卫星不稳定性；几近单态性位点；银染 主题词： 癌；细胞系，肿瘤；微卫星不稳定性? 摘要 背景：为了解实验室常用人癌细胞的微卫星不稳定性情况。 目的：从基因组微卫星水平分析各组织来源人癌细胞株的遗传背景差异。 方法：取10株指数生长期的人白血病、结肠癌、胃癌、肝癌、肺癌、宫颈癌、膀胱癌细胞及2株人正常细胞(人脐静脉内皮细胞、人皮肤成纤维细胞)，提取细胞DNA，对BAT-25，BAT-26，CAT-25，NR-24，SEC-63 五个几近单态性的微卫星位点进行PCR扩增，12%聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染法对产物进行检测，同时用ABI 3720XL自动测序仪测序。 结果与结论：人脐静脉内皮细胞、人皮肤成纤维细胞的5个微卫星位点扩增片段长度具有一致性及稳定性，可作为正常对照。人结肠癌细胞、人膀胱癌细胞在BAT-25、BAT-26、CAT-25或NR-24位点扩增片段长度均较人脐静脉内皮细胞及人皮肤成纤维细胞缩短，缩短产度为7-13 bp，属于微卫星高度不稳定细胞。其他细胞在5个位点扩增片段??长度与人脐静脉内皮细胞、人皮肤成纤维细胞一致，属于微卫星稳定细胞。实验结果揭示了受试人癌细胞基因组微卫星不稳定性水平，为未来选择合适的细胞株进行药物活性筛选等试验奠定了基础。  HYPERLINK / 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建； HYPERLINK / 骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞； HYPERLINK / 骨质疏松； HYPERLINK / 组织工程