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未知病原菌的分离鉴定 伊红美蓝平板--- EMB 克氏双糖铁试验 枸橼酸盐利用试验 吲哚试验 玻片凝集 实验分组 5人/组 1套标本/组（脓汁、痰、尿液、粪便） 进程安排 实验分3次进行 实验材料 脓汁 标本：脓拭子 培养基：血琼脂平板 其他：3%H2O2、兔血浆、生理盐水、革兰染液、玻片等 实验方案 实验操作与观察 实验操作与结果 实验材料 痰 标本：咽拭子 培养基：血琼脂平板 其他：生理盐水、10%胆盐、Optochin纸片、革兰染液、玻片等 实验方案 实验操作 实验操作 实验操作 实验材料 尿 标本：尿液 培养基： EMB平板 克氏双糖铁斜面培养基 动力-靛基质-尿素半固体琼脂培养基 其他：革兰染液、靛基质试剂、玻片等 实验方案 实验材料 粪便 标本：肛拭子（1#、2#） 培养基： EMB平板 克氏双糖铁斜面培养基 动力-靛基质-尿素半固体琼脂培养基 其他：生理盐水、靛基质试剂、沙门菌多价血清、志贺菌多价血清、玻片等 实验方案 讨论内容 针对实验步骤的讨论； 对结果的分析； 还需要进一步做哪些实验； 此次实验成功或需要改进的地方； 其他 肥达试验 (Widal test) 用已知的伤寒沙门菌O、H抗原 、甲型副伤寒沙门菌、肖氏、希 氏沙门菌H抗原的诊断菌液，与 患者血清作定量凝集试验，检测 患者血清中的相应抗体，辅助诊 断伤寒、副伤寒。 Widal test 正常值： 诊断伤寒：O凝集效价1:80, H凝集效价1:160; 诊断副伤寒：O凝集效价1:80, H凝集效价1:80 才有诊断价值. 动态观察：抗体效价随病程延长而上升； 双份血清升高4倍或以上； O与H抗体的诊断意义： O↑，H↑---肠热症(伤寒或副伤寒)的可能性大 O↓，H↓---患病的可能性小 O不高，H↑---预防接种 / 非特异性回忆反应 O↑，H不高---感染早期或与伤寒沙门菌O抗原有 交叉反应的其他沙门菌感染 少数病例在整个病程中，肥达试验始终呈“-”: 早期使用抗生素治疗或患者免疫功能低下 弃0.5ml于消毒缸 1 2 3 4 5 6 NS 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5ml 未知血清(1:10) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 菌液(摇匀) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5ml (4种,1种/人) 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 (阴性对照) 37℃，水浴过夜（完成一个完整的检验） “O”抗原凝集现象：（呈颗粒状薄膜） 100％凝集：“＋＋＋＋”： 上层清亮，底部完全凝集，呈颗粒状薄膜（有卷边）。 75％凝集：“＋＋＋”： 上层不太清亮，底部凝集明显。 50％凝集：“＋＋”： 上层混浊，下层凝集。孔底中央中间约 50％白色沉淀，周围膜状凝集，约50％。 25％凝集：“＋”：液体比较混浊，膜状凝集少。 0％凝集：“－”：如第6孔，混悬后，混浊均匀，底部无凝集。 “H”抗原凝集现象：（呈絮状凝集） 100％凝集：“＋＋＋＋”：液体清亮，底部中央完全凝集，呈蓬松絮状；混悬起来，液体仍然清亮，分散开的絮状凝集块漂浮于液体中。 75％凝集：“＋＋＋”：上层不太清亮，底部絮状凝集明显。 50％凝集：“＋＋”：混悬后，上层均匀混浊，下层絮状凝集约50％。 25％凝集：“＋”：混悬后，液体比较混浊，絮状凝集少。 0％凝集：“－”：如第6孔，混悬后，液体均匀混浊，底部无凝集。 实验报告 班级 学号 姓名 日期 肥大反应(Widal Test) 一、实验目的要求： 二、实验材料： 三、方法： 四、结果： 抗原 抗体效价 O H PAH PBH 五、讨论 TO TH TAH T