肌肉收缩机能实验.pptx

肌肉收缩机能实验 实验目的 肌肉标本收缩现象的描记及单收缩的分析，获得该肌肉收缩的阈值。 了解刺激强度对骨骼肌收缩的影响。 学习掌握刺激器和张力换能器的使用。 加强对神经和肌肉了解，熟练解剖。 实验原理 利用刺激器可诱发蛙的离体神经肌肉标本发生兴奋收缩现象，可利用适当的参数和图形，客观、详细、准确地描述收缩的生理过程与现象。 影响骨骼肌收缩效能的因素 肌细胞最本质的功能是将化学能转变为机械功，产生张力和缩短。肌肉收缩效能表现为收缩时产生的张力和/或缩短程度以及产生张力或缩短的速度。横纹肌的收缩效能由收缩前或收缩时承受的负 荷、自身的收缩能力和总和效应等因素决定的。（所谓总和指骨骼肌收缩的叠加效应） 三．实验设备 １．实验材料：青蛙一只。 ２．实验试剂：任氏液。 实验器材：张力换能器（双凹夹和肌动器）、支架、玻璃针、镊子、手术剪、普通剪、神经剪、绳子、蜡盘、培养皿、胶头滴管、铜锌弓、生理信号采集系统、电脑、电极线。 四．方法与步骤 1.蛙坐骨神经-腓肠肌标本的制备 将探针在枕骨大孔处垂直插入，先是左右摆动探针以横断脑和脊髓的联系，再将探针向前方插入颅腔，旋转并摆动探针以捣毁青蛙的脑组织。将探针转向后方并插入脊椎管内。 将动物腹位放在蜡盘上。在两前肢的下方将皮肤做环周切开。用带齿镊或手撕去前肢以下的全部皮肤。剪开腹壁，在尾杆骨上方2～3节脊椎处，拦腰剪断脊柱和上半段蛙体。弃掉蛙体上半段后的标本置于盛有任氏液的培养皿中。 取一腿放于蛙板上，将标本背侧向上放置。 顺神经走向剪去沿途的小分支，将神经从半膜肌和股二头肌的肌缝中分离出来。再使标本腹面向上， 沿神经向腰部的走向， 用玻璃针小心剥离， 剪去神经干上的所有分支， 然后从脊柱根部将坐骨神经剪下（ 连一小块脊椎骨）。将游离的坐骨神经搭于腓肠肌上； 在膝关节周围剪掉大腿的全部肌肉；用粗剪刀将股骨刮干净，然后在股骨中部剪断，保留一小段股骨。在膝上约2cm 处剪断股骨。认清小腿上的腓肠肌，并在其跟腱下方穿线打方结，保留结线8厘米长。提起结线剪断跟腱，游离腓肠肌。游离腓肠肌至膝关节处，在膝下剪断胫骨。 标本制备完成，将其放在任氏液中浸泡待用。用锌铜弓（电极）检查标本的活性正常与否。 2.连接装置和仪器设备 将电脑和生理信号采集系统打开，并将其连接。将支架和双凹夹、肌动器及张力换能器连接，用电极线将张力换能器连接。拿出泡在任氏液中的标本，使神经放在肌动器电极上，肌肉一端的绳子结在换能器的小孔上，使线垂直，肌肉处于合适的松紧度。 3.实验观察 ① 选定实验项目后，在弹出的刺激器参数设置菜单中，首先将“强度递增刺激”模式改为“单刺激”，刺激波宽设为1ms，并将默认的刺激幅度适当调高。 ② 点“开始采集”快捷键，查看显示屏上是否出现扫描线，进一步“调零”和调节“扫描速度”。 LOREM IPSUM DOLOR ③ 在连线扫描的基础上，点“刺激”键，给予标本单刺激，观察标本有无反应，显示屏上是否有收缩波出现。如果标本没有收缩反应，在确定标本活性正常的情况下，这时应一边增强刺激方波的电压（刺激强度），一边再刺激观察，同时要注意，仪器有无正常的刺激输出，刺激电极是否与标本接触良好。如果有收缩反应，却记录不出收缩波形，则应检查换能器、采集系统、信号输入连线等，并调节仪器灵敏度等参数，直到显示出收缩波形。 ④ 在确定仪器、标本、装置等均无问题，能记录到肌收缩波形的前提下，实验条件不变，进一步改变（减小）刺激电压，测出刺激的“阈值”0.17V。 ⑤ 将刺激参数调回“强度递增单刺激”的模式（组内刺激脉冲数为1），以稍低于“阈值”的刺激电压0.17V，作为起始刺激强度，再视标本活性的高低，调整好刺激递增的电压值（步幅）0.02V。当刺激强度达到某一数值后，肌肉收缩幅度不再随刺激增加而升高。记录此时的收缩曲线和刺激强度。 实验注意点 1．在剥制标本时，不能用金属器械触碰神经干。 2．分离肌肉时，注意按肌肉的层次进行，不要乱剪。分离神经时，一定要把周围的结缔组织剥离干净。 3．在标本制备过程中，勿损伤或用力牵拉神经，术中应经常用Ringer液润湿神经和肌肉。 4.固定张力换能器时，多采用“一维微调固定器”，由上下位置调节钮控制，可在小范围内（上下）精细的移位。这不仅方便了实验操作，也有利于前负荷的控制。 5.测量的方向，即力与位移的方向，要与张力换能器弹性悬梁的前端上下移动的方向保持一致。使能量转换和线性关系良好，符合张力换能器设计与使用上的要求。 6.记录肌肉收缩类实验指标时，张力换能器金属弹性悬梁外露的前端向下移位（下拉），收缩曲线为正立的，即肌收缩时，基线上移，舒张时下移，较为符合一般描记观察的习惯。 7.在使用时不能用手牵拉弹性梁和超量加载。张力换能器的弹性梁屈