脂质体-下载.ppt

4．逆相蒸发法 凝胶 磷酸盐 缓冲液 蒸发 有机溶剂 4．逆相蒸发法 Liposomes 4．逆相蒸发法 本法特点是包封的药物量大， 体积包封率可大于超声波分散法30倍， 适合于包封水溶性药物及大分子生物活性物质。如各种抗生素、胰岛素、免疫球蛋白、碱性磷脂酶、核酸等。 5．冷冻干燥法 脂质体亦可用冷冻干燥法制备，对遇热不稳定的药物尤为适宜。先按上述方法制成脂质体悬液后分装于小瓶中，冷冻干燥制成冻干制剂，全部操作应在无条件菌条件下进行。 5．冷冻干燥法 Payne用冷冻干燥法制备前体脂质体为一干燥且具有良好流动性的颗粒，一旦加水水合，即可分散成等胀的多层脂质体混悬液，适用于静脉给药或用于其它给药途径。 另一方法为将脂质吸附于极细的水溶性载体，如粉末氯化钠、山梨醇或其它的聚合糖类，即可形成高度分散的前体脂质体。与水接触时，脂质溶胀而载体迅速溶解，脂质在水相中形成脂质体。 Ⅴ 脂质体的质量评价 1 大小与形态观察 脂质体的粒径对其性质影响很大，因而测定粒径非常重要。常用方法包括： 电镜法： 热力学光散射法：Zetasizer 3000SH激光测粒仪（Malvern Instruments Ltd） 2 主药含量测定和释放度测定 透析管法和离心法等可用来测定释放度。 3 包封率测定 脂质体包封率的测定方法很多，有离心法、透析法、凝胶柱层析法、导数光谱法等。其中凝胶柱层析法，具有分子筛作用，能使混合物依据分子大小不同而分离，广泛用于脂质体的分离及包封率的测定。 凝胶柱层析法 用于分离脂质体时，脂质体粒子将首先流出，随后游离药物也会被洗脱下来， 因此，游离药物在凝胶柱上保留时间越长，流出越慢，越有利于与脂质体粒子的分离。 三种凝胶流出曲线图 (n=3 ) 游离药物在Sephadex G-50（100～300μ）柱上的保留时间较长，从第六流份开始大量流出，而在Sephadex G-50（50~100μ）和Sephadex LH-20上均从第三流份开始大量流出。 经三种凝胶的洗脱曲线测定，可初步选定用Sephadex G-50（100~300μ）测定包封率，洗脱体积可初步定为10ml。 包封率计算： 重量包封率： 是指包入脂质体内的药物量与投料量的重量百分比。 式中W总、W包和W游——分别表示投料量、包封于脂质体的药量及未包入脂质体的药量。  2) 体积包封率 是指制剂中某类粒子体积V类与总体粒子Ⅴ总体积百分比， 式中V总和V类——分别为脂质体制剂中总体粒子的体积和某类粒子的体积。Qv测定方法有凝胶过滤法和显微镜法等。  3) 药脂包封比（Ew） Ew是指一定重量的类脂（包括PC、CH等）所包封药物重量的百分比， 式中W类脂——处方类脂总量W包——包封药物重量。 4 渗漏率测定 渗漏率表示脂质体贮存期间包封率的变化情况，定义为贮存期包封量的减少与刚制备脂质体的包封量之比 式中Q渗——渗漏率；W总游——定期测得游离药物量；W始游——制备当时测得游离药物量；W包——制备当时包封量；W贮——定期测得包封量。 4 渗漏率测定 一定条件下贮存（灭菌）脂质体，定期（时）取样 用测定包封率的方法（主要用凝胶柱层析）测定脂质体包封量或游离药物量与开始包封或游离药物量比较，再由式计算渗漏率。 5．药物体内分布 通常可以小鼠为受试对象， 将脂质体静注给药，测定不同时间血药浓度， 并定时处死剖取脏器组织，捣碎分离取样， 以同剂量药物作对照，比较各种组织的滞留量，进行动力学处理，以评价脂质体在动物体内的分布。 5．药物体内分布 脂质体以静脉给药时，能选择地集中于单核-巨噬细胞系统，70％-89％集中于肝、脾。 如卡氮芥脂质体注射液在小鼠尾静脉注射后卡氮芥主要被肝、脾摄取，40min在肝中达峰值，8h仍保持较高的滞留量，较同一时间的卡氮芥水溶液摄取量提高10倍。 * 多室脂质体(multilamellar vesicles, MLV) 球径 1~5μm， 有几层脂质双分子层将包含的药物 (水溶性药物)的水膜隔开，形成不均匀的聚合体， 脂溶性药物则分散于几层分子层中。 大多孔脂质体(Multivesicular vesicles, MVV) 球径约0.13±0.06μm，单层状， 比单室质体可多包封10倍的药物。 单室和多室脂质体示意图 脂质体电镜照片 纳米脂质体呈蓝色乳光 二 脂质体的类型 按性能 热敏脂质体 pH敏感脂质体 超声波敏感脂质体 光敏脂质体 磁性脂质体 特殊性能脂质体 脂质体 一般脂质体 二 脂质体的类型 脂质体 按荷电性 中性脂质体 负电性脂质体