薄层色谱法在药物分析中的应用.doc

1 薄层色谱法概述 2 1.1 定义 2 1.2 原理 2 1.3 特点 2 1.4 定量检测方法 3 2 TLC在药物分析方面的应用 3 2.1 中药材的鉴别 3 2.2 植物药成分的鉴别 4 2.3 化学药品及复方制剂 5 2.4 药品杂质检验 6 2.5 中药指纹图谱分析 6 2.6 在定量分析中得应用[13] 7 2.6.1 薄层色谱定量方法 7 2.6.2 薄层色谱在定量分析中得应用 8 3 薄层色谱新技术及其应用 8 3.1 高效薄层色谱（HPTLC） 8 3.2假相薄层色谱 9 3.3 反相薄层色谱( RPTLC) 10 3.4 薄层扫描法[17] 11 4 总结 12 薄层色谱在药物分析中的应用 薄层色谱( Thin Layer Chromatography，TLC) 在药物尤其在植物药成分的定性和定量分析方面早已有了非常广泛的应用。随着科学技术的发展以及新材料的应用，使其得到了很大发展，出现了许多新技术，如高效薄层色谱、假相薄层色谱、反相薄层色谱、微乳薄层色谱在中药药物分析中已有一定的应用。TLC 在规范化、仪器化方面均取得了长足的进步，在大批量样品及某些特殊样品的快速分析中，显示了分析容量大、可采用特征专属的显色剂以及极低的溶剂消耗等优势。近年来TLC 广泛应用于有机化合物的分析鉴定、植物药有效部位的分离精制、有机合成、结构分析、生物测定等，尤其在研究开发植物药有效部位和中成药质量控制中，是用于定性、定量分析的最简便的科学方法。但TLC亦有其缺陷，其色谱结果易受铺板质量、点样技术、展开剂配制、层析环境中展开剂的饱和度、环境温湿度等因素的影响， 有时难于重复；显色又受均匀性、灵敏度、稳定性等影响，这均使测定结果偏差较大[1]。最近几年围绕着测定过程的标准化和自动化，薄层色谱技术有了全新的发展， 扩大了TLC技术在中药药物定性定量分析中的应用。 薄层色谱法（TLC）系将适宜的固定相涂布于玻璃板塑料或铝基片上, 成一均匀薄层。待点样，展开后, 根据比移值(Rf) 与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值(Rf ) 作对比， 用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。 薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法，它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同，使在移动相(溶剂) 流过固定相(吸附剂) 的过程中，连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附, 从而达到各成分的互相分离的目的。 薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，也用于跟踪反应进程，它可以同时分离多个样品，分析成本低，对样品预处理要求低，对固相、 展开剂的选择自由度大，适用于含有不易从分离介质脱附或含有悬浮微粒或需要色谱后衍生化处理的样品分析。TLC 法是一种快速、灵敏、高效地分离微量物质的方法，是最简单的色谱技术之一，具有操作方便，设备简单， 分离效率高，专属性好，分析速度快，色谱参数易调整等特点，在药物分析中应用较为广泛。 吸收测定法对在可见及紫外光区有吸收的化合物可用钨灯和氖灯在20-800nm 范围进行透射和反射吸收法测定。 荧光测定法化合物本身或者经过色谱前和色谱后衍生化生成对紫外有吸收并能放出更长波长的化合物适用荧光法测量, 荧光法灵敏度高。 荧光淬灭法本身无色、又无特征紫外吸收或荧光，并且不易衍生的化合物可采用荧光淬灭法测量，使用含有荧光剂的薄层板 [2]。 用薄层色谱进行指证性鉴别，它们之间的关系是共性与个性的关系。制备试药生药-共性化合物-共性特征(指示性的) 薄层色谱个性化合物个性特征(Rf值、颜色)薄层色谱为生药提供了一个可信的“身份”，它可以提供分子水平上的鉴别作用， 从而确定是不是认定的生药，是不是道地的生药，是不是已失效的生药。中华人民共和国药典2005 版一部规定，人参和西洋参的鉴别必须使用薄层色谱法。取人参及西洋参粉末各19，制成供试品溶液；另取它们的对照药材19，同法制成对照药材试液，再取人参单体皂普Rbl 、Re、Rgl、Rf 和拟人参皂昔Fll 制成对照品溶液，于同一硅胶G薄层板上进行色谱层析，规定供试品谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，在日光及紫外光(365nm) 下，分别显相同颜色的斑点或荧光斑点。在这里我们可以看到，人参分子特征是人参皂营单体，其伪品异类不具备这种分子个性特征, 而且同属不同种的人参和西洋参分子特征亦不同，人参特含皂普Rf， 而西洋参则特含拟人参皂昔Fl l 。这在某种程度上给我们规定了人参特征谱系。这种分子的不同、谱系的不同，就区别了药材的异同[3]。黄玉清[4] 采用TLC 鉴别牡丹皮及其伪品芍药根皮，取牡丹皮、芍药根皮粉各1g， 用乙醚提取后挥发，残渣加丙酮溶解，作为供试液；另取丹皮酚、芍药苷分别加丙酮溶解制成对照液，分别点于同一硅胶G 板上,