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2-2土壤中分解尿素的细菌的分离和计数1剖析
课题2;1、常见的分解尿素的微生物;启示:寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。;2、实验室微生物的筛选原理(P21);3、选择培养基; (1)在培养基的配方中,为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是是什么物质?;(二)统计菌落数目;1、显微镜直接计数法;每一个大方格边长为 1mm ,则每一大方格的面积为1mm2,盖上盖玻片后,载玻片与盖玻片之间的高度为0.1mm,所以计数室的容积为0.1mm3。 ;2、统计菌落数目——稀释涂布平板法;平板菌落数统计注意事项;【例1】某同学在稀释倍数为106的培养基上测得平板上的菌落数的平均值为234,那么每毫升样品中菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL)
A.2.34×108 B.2.34×109
C.234 D.23.4;【解析】稀释倍数为106,0.1 mL稀释液的菌落数的平均值为234,则每毫升样品中菌落数就为234/0.1×106=2.34×109。;交流2:为什么测平板上的菌落数可以推测样品中的活菌的数目?;交流3:统计的菌落数往往比活菌的实际数目高还是低,为什么?;第一位同学结果不具有说服力。
;启 示;实例分析2;实例分析2;实例分析; 实验结果要有说服力,对照的设置是必不可少的!;; 从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右,再取样,将样品装入事先准备好的信封中。;; 测定土壤中细菌的数量,一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养;测定放线菌的数量,一般选用103、104和105倍稀释液;测定真菌的数量,一般选用102、103和104倍稀释液。; 因为土壤中各类微生物的数量(单位:株/kg)是不同的,例如在干旱土壤中的上层样本中:好氧及兼性厌氧细菌数约为2 185万,放线菌数约为477万,霉菌数约为23.1万。; 按照浓度从低到高的顺序取稀释液涂布平板,不必更换移液管。 ; 将涂布好的培养皿放在30℃下培养。比较牛肉膏培养基和选择培养基中菌落的数量、形态等,并做好记录。
; 不同种类的微生物,往往需要不同的培养温度和培养时间。细菌一般在30~37℃的温度下培养1~2d;放线菌一般在25~28℃的温度下培养5~7d;而霉菌一般在25~28℃的温度下培养3~4d。;6、不同??生物有哪些菌落特征?;;操作提示;如何鉴定分离出的细菌是尿素分解菌?;——滤膜法;作业:
1.完成本节分层训练
2.预习课题3
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