栓剂微生物限度检查方法验证方案.doc

Method Validation Scheme 方法学验证方案 栓剂微生物限度检查 Approval Before Execution审核和批准 Written by起草 职 务 签 名 日 期 化验员 Reviewed by审核 质管部部长 Approved by批准 ××××××有限公司 目 录 1. 概述 3 2. 目的 3 3. 范围 3 4. 依据 3 5. 责任 3 6. 人员培训 4 7. 所需文件 4 8. 所需仪器仪表校验 5 9. 试验用培养基、稀释剂、冲洗液、菌种及消毒剂 5 10. 验证内容 5 11. 结果分析及评价 9 12. 进度计划 9 13. 再验证周期 10 概述 根据2015版药典要求，在建立某一药品微生物限度检查方法时应对其检查的方法进行验证，以证明所采用的方法适合于该药品的无菌检查。若药品的组分或生产工艺发生改变时，还应对其检验方法进行重新验证，以确认供试品在该实验条件下无抑菌性或其抑菌活性可忽略不计。 此次验证应进行3次独立试验，所有验证人员都应进行GMP和岗位SOP培训，设备应进行校验。 目的 范围 依据 责任 姓 名 部 门 职 务 职 责 质量 检验 化验员 起草验证方案，负责验证方案的实施，数据的收集、统计，完成验证报告。 质量 检验 部长 审核验证方案，组织验证方案的实施，审核验证报告。 质量 管理 部长 审核验证方案、报告，协调验证方案的实施。 工程部 计量员 负责本次验证中仪器仪表的确认。 公 司 主管副 总经理 批准验证方案，批准验证报告。 培训 所有相关人员均应按如下内容，在验证开始之前进行培训，以使每一名参与验证工作的人员明确自己的职责，更好地完成本次验证工作。 培训内容： ①本次验证的性质； ②验证的内容 ③验证小组成员的分工及职责； ④验证方法及职责 ⑤取样计划及职责； ⑥验证进度计划安排 所需文件 文件资料 编号 存放地点 GCZ—Zk—101 质量检验部 2015年版中国药典四部 —— 质量检验部 所需仪器仪表的校验 器具名称 规格 型号 器具 编号 校验证 书编号 校验 部门 有效 期至 培养箱 立式压力蒸汽消毒器 电热恒温培养箱 试验用培养基、溶剂、冲洗液、菌种及消毒剂验证内容 培养基：胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基、胰酪大豆胨液体培养基、溴化十六烷基三甲铵琼脂培养、甘露醇氯化钠琼脂培养基 稀释剂、冲洗液： pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液 试液：0.9%无菌氯化钠、1%二盐酸N，N-二甲基对苯二胺试液 菌种：包括金黄色葡萄球菌[CMCC（B）26003][CMCC（B）]、枯草芽孢杆菌[CMCC（B）63501][CMCC（B）]、白色念珠菌[CMCC（F）98001][CMCC（F）98003]10.1.2菌液制备： 接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌与枯草芽孢杆菌至胰酪大豆胨液体培养基中，30~35℃培养18~24小时，取新鲜培养物用 0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的菌悬液；接种白色念珠菌至沙氏葡萄糖琼脂培养基中20~25℃培养2～3天，取新鲜培养物用 0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的菌悬液；接种黑曲霉至沙氏葡萄糖琼脂培养基中20~25℃培养5～7天，取黑曲霉的新鲜培养物加入3?5ml 0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。 然后，采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用0. 9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的黑曲霉孢子悬液。 菌液制备后若在室温下放置，应 在 2 小时内使用；若保 存在2?8℃，可 在 2 4小时内使用。黑曲霉孢子悬液可保存 在2?8 ° C ,在验证过的贮存期内使用。 10.1.3供试液： 供试液制备：10ml PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液置45℃水浴浸泡10分钟使熔融，加无菌聚山梨酯80 10ml，使乳化菌、霉菌及酵母菌菌落计数验证方法：验证试验至少进行3次独立的平行试验并分别计算各试验菌株每次试验的回收率。试验组：取1：10供试液 200ml 1%聚山梨酯80。组： 取1：10供试液200ml 1%聚山梨酯80。 200ml 1%聚山梨酯80。试验组：取1：10供试液 200ml 1%聚山梨酯80。组： 取1：10供试液200ml 1%聚山梨酯80。 200ml 1%聚山梨酯80。试验组：取1：10供试液 200ml 1%聚山梨酯80。组： 取1：10供试液200ml 1%聚山梨酯80。 200ml 1%聚山梨酯80。试验组：取1：10供试液 200ml 1%聚山梨酯8