外源蛋白在中国仓鼠卵巢细胞中高效表达的策略.pdf

4·96 · 生物化学与生物物理进展 　　Prog. Biochem. Biophys. 　　　　　2000 ; 27 (5) different complex in nucleus such as RNA transcription , which is the basis of orderly efficient polymerase Ⅱ holoenzyme , chromatin remodeling expression of genes. On the other hand , it is a complexes , nucleosome and enhanceosome , which challenge to study these transcription complexes and participate each step of gene transcription and development of new technology is important . assemble into active transcription complex. Formation Key words 　gene expression regulation , transcription of these complexes integrates lots of information of complex , chromatin transcription regulation and increase the efficiency of 外源蛋白在中国仓鼠卵巢细胞中高效表达的策略 刘国奇 　王海涛1) (军事医学科学院微生物流行病研究所 , 北京 100071) 摘要 　高效表达外源蛋白, 在生物制药中有重要意义. 中国仓鼠卵巢细胞 (Chinese hamster ovary cell) 是表达外 源蛋白的最佳真核表达系统之一. 影响外源蛋白在 CHO 细胞表达的因素甚多 , 主要包括载体 、宿主细胞和外源 基因几方面. 深入了解和灵活运用它们之间的关系 , 有助于获得外源基因在 CHO 细胞中的高效表达. 关键词 　重组蛋白, CHO 细胞 , 高效表达 学科分类号 　Q78 　　中国仓 鼠卵巢细胞 ( Chinese hamster ovary 稳定性及翻译效率 ; d 目的基因拷贝数 ; e 外源 cell , CHO 细胞) 是表达外源真核基因的最佳宿主 蛋白翻译后的加工 、分泌和稳定性. 针对上述因 之一. 但不同研究报道的外源蛋白表达水平差异较 素 , 在构建或选择 CHO 细胞表达载体时应考虑如 大. 本文阐述优化外源蛋白在 CHO 细胞中高效表 下调控元件 : a 启动子和增强子 ( P/ E) ; b 多聚 ( ) ( ) 达的策略. 腺苷酸加尾信号 pA ; c 内含子 INS ; d 选 择标记 , 如共扩增基因二氢 乙酸还原酶 (DHFR) 1 　CHO 细胞表达体系 ( ) ( ) 和谷氨酰胺合成酶 GS ; e 多克隆位点 MCS ;