槐花米中芦丁的提取与鉴定.ppt

槐花米中芦丁的提取与鉴定 背景知识 1.来源 芦丁（Rutin）又称芸香苷，广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。尤以槐花米（为植物Sophora japonica L 的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高，可作为大量提取芦丁的原料。（含量为12％—16％.） 2.结构组成 芦丁是由槲皮素（Quercetin）3位上的羟基与芸香糖（Rutinose）〔葡萄糖（Glucose）与鼠李糖（Rhamnose）组成的双糖〕脱水形成的苷。分子式：C27H30O16 结构组成 3.理化性质 芦丁为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有3分子的结晶水，熔点为174-178℃，无水物188-190℃。 溶解度：黄酮为平面性较强的分子，难溶于水。而黄酮苷因引入糖，水溶性增强，糖链越长水溶性越大，一般易溶于水、甲醇、乙醇等强溶剂中。冷水中为1:10000；沸水中1:200；冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。 4.药理作用 芦丁具有维生素P样作用。能维持血管的正常通透性，减低血管的脆性，缩短流血时间，可作为高血压病的辅助治疗剂。亦可用于防治因缺乏芦丁所致的其他出血症。 一、实验目的 通过芦丁的提取与精制掌握碱-酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。 掌握黄酮类成分的主要性质及黄酮苷，苷元和糖部分的鉴定方法。 三、实验原理 芦丁属黄酮类化合物，分子中有较多酚羟基，具弱酸性，易溶于热碱中，酸化后又析出，因此可以用碱溶酸沉的方法提取芦丁，又利用芦丁在冷水和热水中溶解度相差较大的特性进行重结晶精制。 四、实验材料和器皿 【器皿】 烧杯（500ml）2个，试管2个，布氏漏斗1个，玻璃棒1根，抽滤瓶1个，移液管（10ml）1根，洗耳球1个。 【材料】 槐米花20g，Ca（OH）2 1.5g，镁粉，pH试纸，浓盐酸，95%乙醇，10%α萘酚乙醇溶液，浓硫酸。 五、实验内容 流程图： 操作步骤： ?? 称取20g槐花米于研钵中研成粉状物，置于500mL烧杯中，加水300ml，在搅拌下分次加入石灰乳（150ml水和1gCa（OH）2），调节ph8-9,加热至沸，并不断搅拌，煮沸30分钟后，趁热抽滤。然后用浓盐酸调节pH值为4-5。放置1-2h，使沉淀完全，抽滤，沉淀用水洗涤2-3次，得到芦丁的粗产物。 然后将粗产物（连同抽滤用滤纸）放置在适宜大小的培养皿上，于70℃条件下干燥30-40min，最后收集干燥产物，进行下一步操作。 六、实验关键及注意事项 1.加入饱和石灰水溶液既可达到碱溶液提取芦丁的目的，又可除去槐花米中大量多糖粘液质，更容易过滤。也可直接加入150mL水和1g氢氧化钙粉末，而不必配成饱和溶液。 2.pH值过低会使芦丁形成烊盐而增加了水溶性，降低收率。 七、芦丁的鉴定 芦丁的定性反应 取芦丁3-4mg，加乙醇5-6ml使其溶解，分成二份 作下述试验： A.盐酸-镁粉反应：取上述溶液1-2ml，加2滴浓盐酸，再加少许镁粉，注意观察颜色变化情况。（红色）鉴别黄酮类化合物。 B. Molish反应：糖在浓硫酸或浓盐酸的作用下脱水形成糠醛及其衍生物，再与α-萘酚作用形成紫红色复合物，在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环，因此又称紫环反应。 Molish反应可以鉴定单糖的存在。 取上述溶液1-2ml，先加入几滴浓盐酸（硫酸），再加入等体积的10%α-萘酚乙醇溶液，注意观察两液面产生的颜色变化（紫红色）。 八、思考题 1、在一开始用酸调节pH值时，如果加入的盐酸过量，pH值小于3-4，请问对实验会产生什么后果？为什么？ 2、根据这个实验，请总结出用酸碱调节法提取中药活性成分的适用条件及一般原理。 * * 芦丁分子中具有多酚羟基，显弱酸性，易溶于碱液，酸化后又可析出，因此，本实验采用碱提取酸沉淀法提取芦丁。 斛皮素 芸香糖 二、实验要求 独立完成实验，从槐花米中提取出芦丁并进行鉴定。 芦丁的提取与分离流程图 *