蛋白A亲和层析法纯化单克隆抗体工艺的优化create_pdf.pdf

生 物 工 程 学 报 陈泉 等/蛋白A 亲和层析法纯化单克隆抗体工艺的优化 807 Chinese Journal of Biotechnology /cjbcn June 25, 2016, 32(6): 807−818 DOI: 10.13345/j.cjb.160137 ©2016 Chin J Biotech, All rights reserved 研究报告 A 1 2 2 1 1 2 1 1 2 陈泉 ，卓燕玲 ，许爱娜 ，咸漠 ，彭馨莹 ，杨元生 ，张海波 ，年锐 ，张巍 1 266101 2 138668 , , , . A . , 2016, 32(6): 807–818. Chen Q, Toh P, Hoi A, et al. Improved protein-A chromatography for monoclonal antibody purification. Chin J Biotech, 2016, 32(6): 807–818. 摘 要: 治疗性单克隆抗体药物已成为生物医药领域市场最主要的产品类别。蛋白 A 亲和层析作为第一步捕 获抗体蛋白最为有效的手段仍然在现有单克隆抗体纯化平台中占据主导地位。在本研究中，首先开发了一种基 于低pH 处理抗体细胞回收液的新型细胞液回收技术，该技术能有效去除宿主相关污染物 ( 非组蛋白宿主杂质 蛋白、组蛋白、DNA 、蛋白聚合物等) ，同时保证较高的抗体回收率。通过该技术有效预处理后，蛋白A 纯化 效率可提高 10 倍左右，并且有效避免了抗体洗脱液中和后浊度的上升，大大减轻了后续蛋白纯化的压力。同 时我们也对酸性处理中各种宿主杂质去除机制进行了研究。然后，预处理的洗脱液再经一步Capto adhere 色谱 纯化，非组蛋白宿主杂质蛋白降低至5 ppm 、DNA 小于1 ppb、组蛋白降低至检测限以下、蛋白聚合物小于0.01% 。 总过程抗体蛋白收率 87%。该两步法抗体纯化技术可有效集成至当前主流抗体纯化平台，具有良好的大规模 应用价值。 : 蛋白 A ，单克隆抗体，纯化，细胞回收液，酸性沉淀，宿主杂质蛋白，组蛋白，DNA Received: April 5, 2016; Accepted: April 25, 2016 Supported by: Qingdao Institute of Bioenergy and Bioprocess Technology, Start-up Fund (No. Y571061905), Singapore Biomedical Research Council (No. ETPL/12-R15GAP-0009). Corresponding authors: Rui Nian. Tel: +86-532 Fax: +86-532 E-mail: nianrui@ Wei Zhang. Tel: +65 Fax: +65 E-mail: zhang_wei@.sg (No. Y571061905) (No. ETPL/12-R15GAP-0009) 2016-05-06 /kcms/detail/11.1998.Q1638.003.html 808 ISSN 1000-3061 CN 11-1998/Q Chin J Biotech June 25, 2016 Vol.32 No.6 Improved protein-A chromatography for