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微生物初始化污染检测记录
微生物初始化污染检测记录
一次性使用输液器(内腔、外表面)
1.试品的抽取
抽样地点： 抽样批次： 抽样数量：
抽 样 人： 抽样时间：
2.浸提介质
无菌生理盐水
3.试验前准备
3.1营养琼脂培养基的配制：
成份：NaCl 5g;胨 10g;琼脂 15-20
制法：取牛肉膏3g，加水1000ml，配制成肉浸液，将胨、NaCl、琼脂加入肉浸液内，微温溶解后，调节PH值，为弱碱性煮沸，滤清，调节PH值使灭菌后为7.2±0.2。
3.2与供试液接触的所有器具及制备好的营养琼脂培养基一并放入高压蒸汽灭菌器115℃持续30min,待灭菌器冷却后连同抽取的供试品一并放入无菌室内,启动工作台风机,开紫外线灯30min.
4.供试液制备及接种
4.1内腔供试液制备：
输液(血)器:在无菌条件下向每套输液器的内腔注入浸提介质各20ml,作为供试液,反复荡洗5次,然后将每套输液器内腔内的供试液汇集到一无菌具塞试剂瓶内,待混匀后在从瓶内各抽取1ml供试液分别加入10个无菌的空平皿内,最后在将灭了菌凉至45℃的熔化营养琼脂培养基倾注于已加入供试液的平皿中,每平皿中加入培养基量为15-20ml。作为1：1的供试液。
注射器:每支注射器抽取灭菌生理盐水至公称容量，振摇5次，汇集到一无菌具塞试剂瓶内,待混匀后在从瓶内各抽取1ml供试液分别加入10个无菌的空平皿内,最后在将灭了菌凉至45℃的熔化营养琼脂培养基倾注于已加入供试液的平皿中,每平皿中加入培养基量为15-20ml。作为1：1的供试液。
4.2外部供试液制备：按产品外表面积每10cm2用1mL的灭菌生理盐水冲洗， 作为1：1的供试液。
用棉拭子在输液器表面往返涂抹10次后，将棉试子放入10ml灭菌生理盐水的试管中,将试管震打80次混匀作为供试液,然后再分别取1ml供试液放入2个无菌的空平皿内,最后在将灭了菌凉至45℃的熔化营养琼脂培养基倾注于已加入供试液的平皿中,每平皿中加入培养基量为15-20ml.
将所取10套供试品分别按上述方法进行供试液制备及接种。
加好供试液和营养琼脂培养基后，将平皿盖好小心摇匀,平放台上,待琼脂凝固后,翻转平皿,使底向上,置恒温箱内37℃培养24h.
5.阴性对照和阳性对照
(1).将同批未进行接种营养琼脂平板在37℃下直接进行培养,作为阴性对照.
(2).将同批未进行接种营养琼脂平板,划种金黄色葡萄球菌后在37℃下进行培养,作为阳性对照.
在37℃下培养24h后,阴性对照皿无菌生长而阳性对照皿细菌生长良好情况下方可进行对样品皿进行观察.
6．经过24h、37℃培养后观察：
样品编号
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
Ⅴ
Ⅵ
Ⅶ
Ⅷ
Ⅸ
Ⅹ
对照
阴
阳
平皿编号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
平皿菌落数
7．结果计算：
菌数／套= (平均菌数×稀释倍数)÷套数
8．结果判定：
检验人： 复核人：
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