第三章动物实验基本技术 (NXPowerLite).ppt

第二节 动物给药途径和方法 重点难点： 胃肠外给药方法的掌握 实验动物的麻醉方法 1、皮肤给药: 优点：简单易操作 缺点：方法粗糙，对动物产生的药效不佳。 2、胃肠给药：灌胃 3、胃肠外给药：注射给药 重点难点 胃肠外给药方法的掌握 实验动物的麻醉方法 （二）麻醉方法 1 全身麻醉 （1） 吸入麻醉 将含有乙醚的棉球放入容器中，将动物放入，并盖紧盖子让 乙醚挥发，观察动物的行为。开始动物出现兴奋，继而出现抑制，自行倒下；当动物角膜反射迟钝、肌肉紧张度降低时，即可取出动物。 本法最适于大、小鼠的短期操作性实验的麻醉，也可用于较大的动物。 （2） 非吸入麻醉 非挥发性麻醉是一种既简单方便，又能是动物很快进入麻醉期，而无明显兴奋期的方法，常采用注射方法进行。 静脉注射、肌肉注射多用于较大动物，如兔、猫、猪、犬等；而腹腔注射多用于较小的动物，如小鼠、大鼠、豚鼠等。 由于各麻醉剂的作用长短以及毒性的差别，所以在腹腔和静脉麻醉时，一定要控制药物的浓度和注射量 。 2 局部麻醉 局部麻醉虽然在动物实验中用途不是很广泛，但猫、犬等大动物短时间内实验中可能会使用局部麻醉的方法。 局部麻醉时用局部麻醉药阻滞周围神经末梢或神经干、神经节、神经丛的冲动传导，产生局部性麻醉区。 局部麻醉的特点是动物可保持清醒状态，对重要器官功能干扰轻微，麻醉并发症少。 局部麻醉常用的方法是表面麻醉、浸润麻醉、区域阻滞麻醉以及传导麻醉等，其中浸润麻醉应用最多。 浸润麻醉是将麻醉药物注射于皮肤、肌下组织或手术深部组织，以阻断用药局部的神经传导，使痛觉消失。 3. 麻醉效果的观察 动物的麻醉效果直接影响实验的进行和实验结果。在麻醉过程中必须善于判断麻醉程度，观察麻醉效果。判断麻醉程度的指标有： （1） 呼吸：加快或不规则，则麻醉过浅，可再追加麻醉，若呼吸由不规则转变为规则且平稳，说明已达到麻醉深度。若动物呼吸变慢，说明麻醉过深，动物有生命危险。 （2）反射活动：角膜反射灵敏，则麻醉过浅；反射迟钝，麻醉程度适宜；反射消失，伴瞳孔散大，则麻醉过深。 （3）肌张力：亢进，麻醉过浅；全身肌肉松弛，麻醉合适。 （4）皮肤夹捏反应：麻醉过程中可随时用止血钳或有齿镊夹捏动物皮肤，若反应灵敏，则麻醉过浅；若反应消失，则麻醉程度合适。 4．使用全身麻醉剂的注意事项 　　给动物施行麻醉术时，一定要注意方法的可靠性，根据不同的动物选择合适的方法，特别是较贵重的大型动物。 　　（1）麻醉剂的用量，除参照一般标准外，还应考虑个体对药物的耐受性不同，而且体重与所需剂量的关系也并不是绝对成正比的。一般说，衰弱和过胖的动物，其单位体重所需剂量较小，在使用麻醉剂过程中，随时检查动物的反应情况，尤其是采用静脉注射，绝不可将按体重计算出的用量匆忙进行注射。 （2）. 动物在麻醉期体温容易下降，要采取保温措施。 （3）. 静脉注射必须缓慢，同时观察肌肉紧张、角膜反射和对皮肤夹捏的反应，当这些活动明显减弱或消失时，应立即停止注射。配制的药液浓度要适中不可过高，以免麻醉过急；但也不能过低，以减少注入溶液的体积。 （三）、处死方法 实验者应站在实验动物的立场上以人道的原则去处置动物，原则上不给实验动物任何恐怖和痛苦，也就是要施行安乐死。 安乐死是指实验动物在没有痛苦感觉的情况下死去。实验动物安乐死方法的选择取决于动物的种类、实验目的、对脏器和组织细胞各阶段生理生化的有无影响来确定。 一般遵循的原则有： （1） 尽量减少动物的痛苦，尽量避免动物产生恐惧、挣扎、喊叫 （2）注意实验人员安全，特别是在使用挥发性麻醉剂时，一定要远离火源； （3）方法容易操作； （4）不能影响实验结果； （5）尽可能缩短致死时间； （6）判定动物是否死亡，不仅要看呼吸是否停止，而且还要看神经反射、肌肉松弛等状况。 1、 颈椎脱臼法 大小鼠常用方法。用拇指和食指用力往下按住鼠头，另一只手抓住鼠尾（鼠尾根部），用力往后上方一拉，使颈椎脱臼，造成脊髓与脑髓断离，动物立即死亡。 2、 空气栓塞法 向动物静脉内注入一定量的空气，使之发生栓塞而死。当空气注入静脉后，可在右心随着心脏的跳动使空气与血液成泡沫状，随血液循环到全身。如进到肺动脉，可阻塞其分支，进入心脏冠状动脉，造成冠状动脉阻塞，发生严重的血液循环障碍，动物很快致死。