一种直接用于PCR的土壤微生物DNA提取方法_陈旭玉.pdf

中国农学通报 第24卷 第4期 2008年 4月 农业生物技术科学 · · 33 一种直接用于PCR的土壤微生物DNA提取方法 1 1 2 1,2 陈旭玉 ,周亚奎 ,余贤美 ,郑服丛 1 （海南大学环境与植物保护学院，儋州，571737； 2中国热带农业科学院环境与植物保护研究所儋州，571737） 摘 要:以橡胶林土壤为材料,直接提取土壤微生物DNA。本实验介绍的方法不仅可以获得大片段,并 且不需要纯化即可直接用于PCR扩增和 DNA酶切等后续操作,每克土壤 DNA提取量约为 2.1～ 4.6μg。此方法操作简单、快捷、为土壤宏基因组文库的构建和土壤微生物群落结构的多样性分析提供 基础。 关键词:土壤微生物; 提取; DNA PCR 中图分类号: 文献标识码: Q3 A AnAffectionMethodforDNAExtractionfromSoilMicroorganisms 1 1 2 1,2 ChenXuyu,ZhouYakui,YuXianmei,ZhengFucong 1 (CollegeofEnvironmentandPlantProtection,HainanUniversity,Danzhou573717; 2 EnvironmentandPlantProtectionInstitute,ChineseAcademyofTropicalAgriculturalScience,Danzhou573717) Abstract:InthispaperwetestwithsoilmicroorganismsfromHeveaforest,anddirectextractmicrobialnu- cleicacidfromsoil,Theresearchshowsthatthismethodofintroductioninthisexperimentnotonlygenerate thelargestDNAfragmentsinsize,butalsoitwasdirectlyusedasPCRamplificationanddigestionofrestric- tionenzymesandlateroperationwithoutpurification,about2.1-4.6μgDNAyieldscouldbeextractedfrom onegramsoilonaverage.Thismethodiseasyandquicklyinoperation,andprovidethebasisofthecon- structionofmetagenomiclibraryanddiversityanalysisofsoilmicrobialcommunities. Keywords:soilmicroorganisms,DNAextraction,PCR 7 别是样品的预处理及提取过程，一般耗费的时间比较 土壤微生物资源丰富，每克土壤含有大约10个