维生素、核酸的化学.ppt

帽子结构 mRNA核内向胞质的转位 mRNA的稳定性维系 翻译起始的调控 帽子结构和多聚A尾的功能 2. tRNA：10-15%，70-90个核苷酸 特点（稀有碱基多，分子量小） 结构：二级结构----三叶草形 主要组成:四臂三环 氨基酸臂 功能：结合氨基酸 T?C环 额外环 （可变环） 反密码子 功能：识别密码子 反密码环 DHU环 功能：与核糖体rRNA结合 假尿嘧啶 三级结构：倒L形 * tRNA的功能 活化、搬运氨基酸到核糖体，参与蛋白质的翻译。 3. rRNA： 特点（含量最大70-80%，甲基化多） 种类：原核：23S、16S、5S， 真核：28S、18S、5S、5.8S * rRNA的功能 参与组成核蛋白体，作为蛋白质生物合成的场所。 原核细胞 真核细胞 rRNA种类 5S 16S 23S 5S 5.8S 18S 28S 核蛋白体大亚基 5S 23S 5S 5.8S 28S 核蛋白体小亚基 16S 18S E.coli 5S rRNA二级结构 E.coli 16S rRNA二级结构 3. 其他小分子RNA 除了上述三种RNA外，细胞的不同部位存在的许多其他种类的小分子RNA，统称为非mRNA小RNA(small non-messenger RNAs, snmRNAs)。 snmRNAs的种类 核内小RNA 核仁小RNA 胞质小RNA 催化性小RNA 小片段干涉 RNA snmRNAs的功能 参与hnRNA和rRNA的加工和转运 第二节 核酸的理化性质 核酸的最大吸收波长 260nm 吸光度 波长 260nm 一、核酸的紫外吸收 用途： 定性检测核酸 紫外光 吸收 光吸收基团:碱基 原因:碱基有共轭大?键 核苷酸、RNA、DNA紫外吸收的区别 吸光度 波长 260nm 游离核苷酸 RNA或单链DNA DNA 概念：在物理、化学因素的作用下，DNA解开，氢键断裂，双螺旋松散成为无规则线团结构称为变性。 二、核酸的变性、复性 变性不会破坏DNA 的共价键 吸光度 波长 260nm 变性DNA 正常DNA 特点：1.紫外吸收增加 增色效应:DNA变性过程中，其紫外吸收增加的现象。 2.粘度下降 温度 A260 变性因素：强酸碱、有机溶剂、高温等等。 50% Tm 热变性和变性曲线 Tm（变性温度、熔点、解链温度）：DNA双螺旋结构一半解为单链时的温度。 不同DNA的Tm值不同，一般在82-95℃之间 单链(%) 100 曲线说明DNA变性是爆发式 温度 单链(%) 100 50 Tm Tm Tm Poly A-T 影响因素：1. G+C含量 DNA poly G-C 2. DNA的复杂程度（均一性）：均一性好，则熔解温 度范围窄。 3. 介质的离子强度：离子强度高，则Tm值高。 概念：变性DNA重新成为双螺旋结构的现象 特点：紫外吸收减少 减色效应：DNA复性过程中，紫外吸收减少的现象 常用的复性方法：退火 （温度缓慢降低，使变性的DNA重新形成双螺旋结构的过程） 复性： 概念：不同来源的核酸链因存在互补序列而形成互补双链结构，这一过程就是核酸杂交过程。 包括 DNA—DNA 杂交 DNA—RNA 杂交 RNA—RNA 杂交 原因：不同核酸的碱基之间可以形成碱基配对 用途：是分子生物学研究与基因工程操作的常用技术 三、核酸杂交 DNA-DNA 杂交双链分子 变性 复性 不同来源的DNA分子 * ‘ * (三）二磷酸和三磷酸核苷或脱氧核苷 ATP(能量供应） cAMP（信息传递） 四、核酸的分子结构 核酸分子是由许多单核苷酸彼此间通过3′,5′磷酸二酯键连接而成的多聚核苷酸链。3′,5′磷酸二酯键是核酸分子主链的连接键 （一）核酸的连接方式 5′磷酸 3′羟基 3′,5′ -磷酸二酯键 (二 ）核酸的表示方式 1、短线式表示法 P P P P A T G C 5′pTpApCpGpApGpCpTpTp 3′ 5′-T-A-C-G-A-G-C-T-T- 3′ 2、字母表示式 多核苷酸链 3′端 5′端 （三）DNA的分子结构： 1. DNA的一级结构：DNA分子中，脱氧核糖核苷酸残基的排列顺序。 —A-T-G-C-C-A-G-G-T— —T-A-C-G-G-T-C-C-A— 5ˊ 3ˊ 3ˊ 5ˊ 染色质 D N A 蛋白质 少量RNA 非组蛋白 2. 真核细胞染色质DNA与原核生物的一级结构特点 组蛋白 重复顺序 重复顺序（repetitive sequence）：在真核细胞染色质DNA基因组中有多个重复排列的核苷酸序列，约占50%。根据重复程