211植物细胞工程基本技术.doc

2.1.1植物细胞工程的基本技术 【学习目标】掌握植物组织培养和植物体细胞杂交技术。 【自主学习】 细胞工程和植物细胞的全能性 细胞工程的含义 原理和方法 和 操作水平 水平或 水平 目的 按照人们的意愿改变细胞内的 或获得 分类 和 2、植物细胞的全能性 （1）含义：具有某种生物 的任何一个细胞，都具有 的潜能。 （2）脱分化：让 的细胞，经过诱导后，失去其特有的 而转变成未分化的细胞，进而形成 。 （3）再分化： 在一定的培养条件下，分化出 ，进而形成完整植株。 思考：在生物体内，所有的体细胞细胞核中的遗传物质都相同吗？为什么？ 。 植物组织培养技术 理论基础： 过程： 离体植物的 _ 组织幼根和芽或胚状体 完整植株。 胡萝卜的组织培养实验 ①．将 用自来水充分洗净，削去外皮，并切成段。用酒精棉球擦手 。 ②．在超净工作台(或接种箱)上将胡萝卜段用酒精溶液消毒30s后，立即用 清洗2～3次，再用 处理30min后，立即用无菌水清洗2～3次。 ③．用 的滤纸吸去胡萝卜段表面的水分。然后，在 瓷砖上，用无菌的解剖刀将胡萝卜段切成1 cm厚的横切片，再选取有 的部位，切取1 cm。左右的小块。 ④．将 接种到培养基上，用锡箔纸封盖瓶口，并用橡皮筋扎紧。然后，在培养瓶上贴上标签，写明材料名称、接种日期和小组号。 ⑤．将接种后的胡萝卜组织块，放在 恒温避光条件下培养。4d后，检查培养材料的污染情况；14d后，观察愈伤组织的生长状况。然后，在恒温箱中继续避光培养。在培养过程中，注意定期观察和记录愈伤组织的生长情况。 ⑥．培养一段时间后，将生长良好的 转接到分化培养基上，培养一段时间后，胡萝卜的愈伤组织就可以诱导出 。然后将试管苗移栽到大田，培养成 。 注意事项 ⑴．外植体的选择与制备 ①选择外植体时，由于外植体的脱分化难易因植物种类、器官来源及生理状况的不同而有很大差异，因此，选择哪些作为外植体应该注意。一般来讲，烟草、胡萝卜，植物的花和幼嫩的组织脱分化相对较易，而植物的茎、叶和成熟的老组织则较难。 ②制备外植体首先要消毒，其次要选取有形成层的部分，因形成层细胞易脱分化。 ⑵．植物组织培养注意的要点 ①培养基包括所有操作工具都应进行消毒和灭菌，谨防杂菌污染。 ②需在无菌条件下操作。 ③接种，继代培养的转移都应在接种箱内进行。 三、植物体细胞杂交技术 1．概念：不同种植物的 ，在一定条件下融合成 ，并把杂种细胞培育成新的 的技术。 2．过程 植物细胞A原生质体A 杂合原生质体 植物细胞B原生质体B 杂种细胞再生出细胞壁 杂种植株 再生出小植株 愈伤组织 3、人工诱导的方法 ①物理方法： 、 、 等 ②化学方法； 等。 4．意义：克服 的障碍，打破物种之间的生殖隔离、扩大遗传重组范围。 探究主题1：细胞工程的含义、细胞的全能性 1、请从操作水平和目的两个方面比较基因工程和细胞工程的不同点 结合细胞全能性的概念，思考下列问题： （1）根据你所了解的知识，试分析不同体细胞表达全能性的难以程度是否相同，请举例说明 （2）植物细胞表现出全能性的必要条件是什么？ 探究主题2：植物组织