课题微生物的实验室培养ppt课件.pptVIP

选择培养基 * * 常见的三种细菌典型形态 A.球菌 B.杆菌 C.弧菌 课题1 微生物的实验室培养 一、培养基的概念、种类及营养要素 1．概念：人们按照微生物对___________的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 2．种类 营养物质 培养、分离出特定的微生物 添加（或缺少）某种化学物质 选择培养基 鉴别不同种类的微生物 添加某种指示剂或化学药品 鉴别培养基 目的用途 工业生产 由天然成分配制而成， 培养基成分不明确 天然培养基 菌种分类、鉴定 由已知成分配制而成， 培养基成分明确 合成培养基 化学组成 工业生产，连续培养 不加入琼脂 液体培养基 观察微生物运动、鉴定菌种、保藏菌种等 加入琼脂较少 半固体培养基 微生物的分离、计数等 加入琼脂较多 固体培养基 物理性质 主要应用 配制特点 培养基类型 标准 菌落: 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 营养要素： 各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求。 加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物 加入四环素、卡那霉素等抗生素的培养基: 分离导入了目的基因的受体细胞 可抑制细菌、放线菌细胞壁主要成分肽聚糖的合成 其细胞壁是由几丁质、葡聚糖组成 （二）无菌技术 1.无菌技术的概念： 无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 消毒定义： 2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 灭菌定义： 是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽胞、孢子）。 是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽胞和孢子。 1、灼烧灭菌： 灭菌的方法： 2、干热灭菌： 160～170℃下加热1～2h。 3、高压蒸气灭菌：100kPa、121℃条件下维持15～30min。 答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。 答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。 1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？ 2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手 思考： 计算?称量?溶化?灭菌?倒平板 三、实验操作 1、制备培养基 （二）纯化大肠杆菌 接种方法有：平板划线法和稀释涂布平板法 ①平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面.在数次划线后,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落. 将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环_______ 在_______旁冷却接种环，并打开棉塞 将试管口通过火焰 .将已______的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液 左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划__________条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养基。 火焰 冷却 三至五 灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的_______开始往第二区域内划线。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连。 末端 烧红 将平板_____放入培养箱中培养。 倒置 1.接种环只蘸一次菌液,但要在培养基不同位置连续划线多次. 2.划线首尾不能相接 3.划线后,培养皿倒置培养 划线分离法注意事项: 其他画线分离图： 1.为什么在接种前以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 讨论： 2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终