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1 6 s R N A 序 列 分 析
前言
点阵分析(dot-matrix analysis),是指将两条以上核酸或氨基酸序列分别列示于纵横坐标,在同一位置上出现相同符号并形成连线,以揭示序列中重复片段或两条序列同源性的方法。
16sRNA是原核生物核糖体小亚基上的RNA,这段RNA序列在不同的细菌中的结构、功能都具有高度保守性,完成测序后通过点阵分析可以确定其同源性比较、用于细菌的系统分类鉴定、多样性和亲缘关系分析等。
虽然相对保守,但在不同的微生物中,16sRNA基因序列还是存在差异的,一般来说,16sRNA序列越接近,菌种关系越近,同源性越大;反之,16sRNA序列差异越大,同源性越小。
而本文主要利用点阵分析的方法对不同菌种的16SrRNA基因进行局部比对,通过比较两个序列之间的相似区域和保守性位点,寻找两者可能的分子亲缘关系,以及进化途径的关系,从而为生物进化的研究提供理论基础。
内容
在窗口值为50,阈值为80的情况下,对细菌(变形链球菌、运动发酵单胞菌、霍乱弧菌、嗜热脂肪土芽孢杆菌、海氏肠球菌)、古生菌(硫磺矿硫化叶菌)以及真核生物线粒体(爪哇根结线虫线粒体)16sRNA两两序列间的点阵分析如下:
1. 运动发酵单胞菌 subsp mobilis 部分的16srRNA序列
链球菌mutans16SrRNA
(Streptococcus mutans 与Zymomonas mobilis subsp.mobilis)1-2
2. 霍乱弧菌局部的16srRNA基因序列
链球菌mutans 16SrRNA
(Streptococcus mutans与Viibrio cholerae)1-3
3. 嗜热脂肪土芽孢杆菌
链球菌mutans 16SrRNA
(Streptococcus mutans与Geobacillus srearothermophilus)1-4
4. 肠球菌种局部的16srRNA基因序列
链球菌mutans16SrRNA
(Streptococcus mutans与Enterococcus hirae)1-5
5. 爪哇根结线虫线粒体
链球菌mutans16SrRNA
(Streptococcus mutans与mitochonddrion meloidogyne javanica)1-m
6. 硫磺矿硫化叶菌
链球菌mutans16SrRNA
(Streptococcus mutans与Sulfolobus solfataricus)1-s
7. 硫磺矿硫化叶菌
爪哇根结线虫线粒体
(mitochonddrion meloidogyne javanica与Sulfolobus solfataricus)m-s
结果
变形链球菌-远动发酵单胞菌: 变形链球菌129~190、580~640、710~770处的碱基分别于运动发酵单胞菌180~255、630~705、800~860处的碱基大致相同;相似性较高,亲缘关系较近,分子进化关系较近;
变形链球菌-霍乱弧菌:相似性一般,亲缘关系一般,分子进化关系一般;有相似序列如变形链球菌160左右、600~641处的碱基分别与霍乱弧菌217左右、649~679处的碱基大致相同;此部分序列可能对基本生命活动来说不可缺少或者有相似的功能。
变形链球菌-嗜热脂肪土芽孢杆菌:相似性较高,亲缘关系较近,分子进化关系较近;此部分序列有明显的相似序列如变形链球菌129~193、340~380、740~810处的碱基分别与嗜热脂肪土芽孢杆菌180~259、390~431、835~905处的碱基大致相同;有几处直线断裂,说明进化过程中可能有碱基的突变或者小片段染色体的缺失。
变形链球菌-海氏肠球菌:相似性很高,亲缘关系很近,分子进化关系很近;有极明显的相似序列如变形链球菌160~225、331~375、480~540、670~825处的碱基与海氏肠球菌299~365、440~481、577~635、780~930处的碱基大致相同,除此之外别的地方还有零星的相似片段;有几处直线断裂,说明进化过程中可能有碱基的突变或者小片段染色体的缺失。
变形链球菌-爪哇根结线虫线粒体:相似性很低,亲缘关系较远,分子进化关系较远;无明显的相似片段。
变形链球菌-硫磺矿硫化叶菌:相似性极低,亲缘关系极远,分子进化关系极远;几乎没有相似序列,。
爪哇根结线虫线粒体-硫磺矿硫化叶菌:几乎无相同或相似序列。
分析与讨论
以变形链球菌的16sRNA序列作为对比分别与其他四种细菌、一种古生菌和一种真核生物线粒体的16sRNA序列作对比,由其序列的相似性可知其同源性和进化方向。变形链
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