消化性溃疡气虚血瘀证代谢组学探讨.doc

消化性溃疡气虚血瘀证的代谢组学研究 　　摘要：目的研究消化性溃疡气虚血瘀症的代谢组学特征，以代谢组学的角度，全面阐明该证型的物质化基础。方法选择2014年1月―2015年1月本院脾胃科收治的80例消化性溃疡患者为研究对象，将其设定为观察组，另取同期来本院行健康检查的正常者为对照组，收集受试者的血液，胃镜病理标本，实施病理表述和代谢组学研究，对结果使用多元化数据进行比较。结果和正常对照组相比，气虚血瘀组患者在血清代谢物图谱上存在显著差异。结论和正常人相比，气虚血瘀症在代谢谱上存在显著差异，这些差异化代谢产物可能为病症形成的物质性基础，在对患者进行临床诊断与治疗的过程中，将中医辨证理论与代谢组学全面结合，可起到辨别患者疾病严重程度，对于其疾病预后来讲，有着非常重要的现实意义，在很大程度上增加了诊断客观性，值得进一步推广使用 关键词：消化性溃疡；气虚血瘀症；代谢组学 中图分类号：R256.3文献标志码：A文章编号：1007-2349（2016）10-0025-04 辨证论治为祖国医学中重要组成部分之一[1]。症候来自于前人总结，有着较强的主观性，辨证施治的准确程度和治疗结果息息相关。随着我国中医现代化进程的不断加速，在卫生部门也制定出了一些症候的规范性标准。这些均为临床诊断提供了理论依据，但值得说明的是，对于症候的诊断依旧缺少公允性标准。这也就证实，使用有效方式，对中医症候本质和理论依据加以研究有着非常重要的现实意义存在。中医症候学为多因素参与的开放性系统[2]，有着多层次的特征，该研究和代谢组学研究对象有相似的地方，把代谢组学理论和方式引入到症候研究之中，对有关证型进行量化分析，探究中医证型之基源，为中医症候学研究的切入点 1资料与方法 1.1一般资料选择2014年1月―2015年1月本院脾胃科收治的80例消化性溃疡患者为研究对象，经临床诊断与相关检查，患者确诊。本实验通过我院伦理委员会审查，同意执行，患者自愿参加实验调查，在此同时签署了知情同意书。经中医诊断，患者均符合气虚血瘀证临床诊断标准：胃脘痛，胀满，困乏无力，胃中嘈杂，不思饮食，大便困难，偶有黑便。舌紫，存在瘀症。脉弦涩或脉细数。在此其中男48例，女32例。年龄区间为35.9～68.4岁，平均年龄为（44.7±2.3）岁。患者符合实验标准，排除对象为[3]：（1）存在消化道大出血或者球后溃疡者；（2）在治疗一周内使用过甾体消炎药或抗生素者；（3）其他器官器质性病变者；（4）恶性肿瘤者；（5）经内窥镜检查证实为溃疡合并穿孔性溃疡，胃底部溃疡与巨大溃疡者；（6）精神疾患者；（7）孕期，哺乳期女性；（8）不同意参加实验调查者；（9）继发性病变者。另取同期来我院体检的健康者80例为对照组，2组受试者的年龄，性别文化程度等基线资料不存在统计学差异，具有可比性（P0.05.） 1.2方法 1.2.1实验器材本实验使用德国西门子公司生产的涡旋仪和冷冻离心机进行相关检查 1.2.2实验材料本实验材料为甲酸，乙腈与甲醇，均由北京诺康生物有限公司提供。浓度符合实验标准。色谱柱为ZORBAX C18柱，由安捷伦公司提供 1.2.3样本收集在明确患者疾病分型之后，采取清晨空腹血液，共计6ml，后在采血管内静置30 min后，目的在于凝固血液，实现血清分离，后使用5000转/min离心5分钟。后取用上清液，在每个管内放置0.5 mL，于-80摄氏度环境下保存 1.2.4收集样本检测前的相关处理工作选择患者的受试患者的血清样本，每组设定为7个，于常温环境下融化。选择吸取0.2～2 mL血清放置在子弹头中，加入容量为0.8 mL甲醇，涡旋设定为30 s，环境为4℃。10 000 g离心时间为10 min。选择上清液0.5 mL。放在液相进样瓶内实施检测 1.2.5质谱条件本实验使用TOF MS-IDA-MS/MS视为质谱条件，使用正离子方式加以检测，气帘气设定为40psi，喷雾电压设定为5500eV。辅助气为60psi，离子源温度为550℃，去簇电压为70eV.TOF MS的扫描范围为50～1500 m/z。于IDA条件下实施下述设置：碰撞电压差为10eV.碰撞电压为35eV.实施开启动态背景扣除 1.2.6色谱条件在0 min时，乙腈（其中含有0.1%甲酸）占有5%，纯净水占有95%；在10 min时，全部为乙腈（其中含有0.1%甲酸） 1.3观察指标（1）胃镜病理学结果；（2）血液的代谢组学结果 1.4统计学原理本实验使用高效液相色谱-质谱法对血清代谢物谱实施检查，实施PCA和最小化二乘法实施全面分析，识别模式，得到的相关数据进行多元化分析处理 2结果 2.1气虚血瘀型溃疡者与正常对照组血清代谢学分析情况见图1 从图谱