Ewing 氏肉瘤分子细胞遗传学研究 Molecular Cytogenetic Studies of Ewing′s Sarcoma.pdf

遗传 HEREDITAS(Bcijing)15(5):1-51993 ·研究报告 · Ewing氏肉瘤的分子细胞遗传学研究 毛 新 华（西医科大学精神科遗传室，成都610041) 阿部周一 野岛孝之 吉田迪弘 （日木北海道大学理学部动物染色体研究施设） 用1例Ewing氏肉0 (ES)患者 例（3)的瘤组织mRNA构建了cDNA文库，从中筛选出含有与人，一 烯醇化酶 (y-cnolase,yENO)基因同源的cDNA克隆．根据其中同源性＞70％的第1216和1534号核普 酸序列，设计合成了1对人yENO基因特异性引物，用PCR从例3痢组织DNA中分离出1个 181bp片 段．用其作DNA探全卜与EcoRI,BamHI及HindIll酶切的例 1和例2患者配对的正常组织 N（）和痛组织 (T）以及例3的TDNA杂交，在患者的NDNA中识别出2-6个等位片段，在例3TDNA中识别出 卜4 个等位片段，在例2TDNA中识别出多个等位片段‘的丢失，在EcoRI酶切的例 1TDNA中识别出1个 17.5kb新片段，在BatnHI酶切的例 ITDNA中识别出丢失 1个2.8kb)毛段‘．此外，用DIS57,D2S44, D2S3,D13S30,DIM S个DNA标识探V与‘例 1和例2配对的N和TDNA杂交表明，两例患者的 TDNA丢失 1个D2S44等位片段，例 1TDNA有DDS30基因的部分扩增，例2TDNA有D2S3, D13530及DIM 基因的部分缺失．3例ES瘤细胞均存在染色体数！」及结构异常，其中例2和例3有t (11;22)(q24;q12)异常． 关键词 Ewing氏肉瘤，分子细胞遗传学 MolecularCytogeneticStudiesofEwingsSarcoma M aoXin (DepartmentofPsychiatry,WestChinaUniversityofMedicalSciences,Chengdu610041) SyuitiAbc TakayukiNojima MichihiroC.Yoshida (ChromosomeResearchUnit,FacultyofScience,HokkaidoUniverstiy,Sapporo,Japan) Ewing氏肉瘤 E（wingssarcoma,ES)是一种软组织恶I生）][I[瘤，发病率为 1.7/1000000，发病 年龄1.5-59岁，以20岁左右患者多见。该肿瘤主要发生二l骨骼，瘤细胞呈小圆形．虽然在培养的 ES瘤细胞中检出有y-烯醉化酶 ：（一。nolasc,yENO）及胆碱脂酶的表达 4)〔，但该肿瘤的起源仍有 争议。迄今为止，ES的病因及癌变机理尚不清楚。 1 近年来一些学者发现，多数的ES瘤细胞存在t(1l;12)(q24;q12）染色休异常 4〔,6)。还有的 学者对具有t(11;22)(q24;q12)的ES的染色休原位杂交及DNA印迹实验研究表明，t(ll;22）易 位断点处的基因发生了易位，但无结构和表达异常 3〔，月，’”〕．另一些学者先后从鼠和人脑组织中分 离出，ENO基因，并已将人，ENO基因定位于人染色休12p13c7-9)．但ES的，ENO基因是否 与人脑的该基因同源，是否存在该基因以及其它基因的异常尚不清楚． 为了系统研究上述问题，我们采用分子克隆、DNA测序及PCR技术从1例ES患者瘤组织 DNA中分离出yENO片段，用其作探针加上其它5个染色体特异性DNA标识探针，对3例ES 进行了DNA印迹研究和染色休分析，结果如下。 材 料 与 方 法 一（）病例及标本 本研究共收集ES患者3例，均为男性，年龄10-12岁．将新鲜的肿瘤标本和接种裸鼠后形成 的肿瘤标本于一70℃保存．用例