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Western Blot之PAGE胶电泳和转膜[选购宝典] 胶电泳|Western-生物通 Page 1 of 7 生物通首页 今日动态 生物通商城 人才市场 核心刊物 仪器龙虎榜 特价专栏 生物 中国科学人 新技术专栏 技术讲座 技术期刊 会展中心 生物通快讯 表观论坛 ÄK 测序 | miRNA | 表观遗传 | 蛋白研究 | 细胞研究 | 免疫学 | 转染 您所在的位置：首页 新技术专栏 Western Blot之PAGE胶电泳和转膜[选购宝典] 【字体： 大 中 小 】 时间：2005年09月13日 来源：生物通 摘要： 在转移膜上显色其实就像是画家在画布上作画一样，不光要 有好的画笔和颜料，适合的画布也是相当之重要。Western Blotting亦是如此，没有选择好合适的转移膜是无法做出漂亮的 结果的。因此，选择适合的转移膜，要让转移“膜”高一尺，帮 衬而不是阻碍到我们的实验。 免费索取： 仅需3398元，Amersham ECL预制胶电泳礼包拿回家！ 分享到： • 别出心裁 特别好用的蛋白分子量标准 • 谁可小看“蛋白标准”（下） • 谁可小看“蛋白标准”（中） • 谁可小看“蛋白标准”（上） • WesternBlot仪器之选 href=/newsf/2005-8/2005825181619.htm target=_blankWesternBlot仪器之选 • Western Blotting前传：想成为高手吗？ • Western Blot为什么必须要用内参？       生物通Western Blot技术专辑之PAGE胶电泳和转膜 /newsf/2005-9/2005913154358.htm 2013-1-24 Western Blot之PAGE胶电泳和转膜[选购宝典] 胶电泳|Western-生物通 Page 2 of 7     PAGE倒胶的仪器我们在前面WesternBlot仪器之选已经介绍过了，除了顺手的工具能防止漏胶，PAGE 剂和配方比例对电泳结果的质量当然有决定性的影响，这个配胶的比例，在《分子克隆》上有详细的论述 家都不难查到。容易忽视的问题主要在于过硫酸铵（AP）一定要新鲜——最好用小指管配AP（写日期）保 度，超过2周的AP扔掉算了，或者已经反复打开使用多次的AP都别用，小气病发作的后果往往是得不偿失 不好多半是这里疏忽（或者混合不匀），因为相对配胶的其他组分，AP算最活跃分子——如果还有诸如漏 或者配比错误或者Buffer搞错，那绝对是你自己找骂，不值得同情。水要用去离子的纯水，MilliQ级更好 Cambrex(原来的FMC)有商品化的丙烯酰胺母液，很贵，也很好——配出的胶对200KD以上的蛋白的分辨率 PAGE胶，条带清晰漂亮，可惜一直没有搞清楚配方的奥秘；但是数十倍于丙烯酰胺粉剂的价格令人却步， 接触丙烯酰胺粉尘严重过敏的人可以选择这个。更加豪华的选择是已经凝好的预制胶，各种配方各种比例 大小多少任君选择，打开即用，当然更直接方便，更吸引人的是结果漂亮，分辨率高，特别是重复性好， 是razor sharp啊！平时都能用这么豪华的东西心情当然超爽啊，实验紧凑又轻松，效率也更高啊！如 能这么“好马配好鞍”，想必更容易出结果，也就更容易拿经费吧！什么时候我们的实验才能实现这种良 啊！Invitrogen旗下的Norvex和Cambrex（原来的FMC）PAGEr都是首选预制胶。可是在“社会主义初级阶 奢侈品平时流流口水就算了，偏偏最近Invitrogen公司推出了新的优惠活动，买3盒NuPAGE预制胶就送电 电转移，面对这种诱惑，你难道就没有一点非份之想的冲动？ 上样电泳：上样前蛋白样品最好离心，上样量不宜过多，以免看结果时，每个条带都弯弯地“笑”你贪多 哦。其他的操作，按照说明控制电