三角叶滨藜甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因的克隆和序列分析.pdf

南京农业大学学报 　2004 , 27 ( 1) : 15～19 　 Journal of Nanjing Agricultural University ( ) 三角叶滨藜甜菜碱醛脱氢酶 BADH 基因的 克隆及序列分析 1 , 2 1 3 2 4 2 何晓兰 , 侯喜林 , 吴纪中 , 刘桂华 , 钦佩 , 朱卫民 ( 1 南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室 , 江苏 南京 210095 ; 2 江苏省农业科学院遗传生理研究所 , 3 粮食作物研究所 , 江苏 南京 210014 ; 4 南京大学生物技术研究所 , 江苏 南京 210093) ( ) 摘要 : 以藜科植物山菠菜甜菜碱醛脱氢酶 BADH 基因的保守区设计引物 , 通过 RTPCR 技术 , 从三角叶滨藜 cDNA 中 分离了两个 BADH 基因片段 BADH 和 BADH , 并利用巢式 PCR 、cRACE 以及 3′RACE 获得全长 BADH 。测序结果表明 , 3 5 3 BADH 和 BADH 之间的核苷酸同源性为 81 % , 其推测的氨基酸序列同源性 80 % 。全长BADH 核苷酸序列长 1 815 bp , 79 3 5 3 ～1 578 bp 为一个开放阅读框架 , 推测的氨基酸序列全长 500 个氨基酸残基 , 相对分子质量为 54 700 , pI 为 55 。其核苷 酸序列和推测的氨基酸序列与山菠菜同源性分别为 95 %和 93 % 。由三角叶滨藜 3′端部分BADH 基因的克隆 gBADH1 和 gBADH 推测的外显子序列分别与 BADH 和 BADH 完全一致 , 且 gBADH 和 gBADH 的内含子插入位置和大小有较大差 2 5 3 1 2 异。表明三角叶滨藜 BADH 基因是一个多基因家族 , 至少存在 2 个成员。 关键词 : 三角叶滨藜 ; 甜菜碱　脱氢酶 ;