影响血液凝固的因素及其红细胞渗透脆性.ppt

一、影响血液凝固的因素二、红细胞渗透性溶血实验 生理学教研室 实验三 实验目的 观察某些因素对血液凝固的影响 异物（棉花、纱布、石蜡油） 温度（水浴、冰浴） 抗凝物（肝素、草酸钾） 熟悉红细胞溶血现象 实验原理：生理止血功能 血管损伤 血管内皮下组织暴露 血小板激活 粘附、聚集、释放 血小板止血栓形成（初步止血） 血凝块形成（有效止血） 凝血系统激活 纤维蛋白形成 影响生理止血的因素 （1）影响凝血酶活性： 肝素 （2）物理因素： 接触面（纱布、石蜡油） 温度（37℃、冰浴） （3）化学因素： 抗凝剂：与Ca2+结合的草酸钾 实验步骤 1. 取7支试管，按表5-3处理试管，并在各试管上 做好标记。 2. 家兔耳缘静脉注射3％戊巴比妥钠1.0mL/kg， 气管插管，一侧颈总动脉插管（动脉插管内 先充满0.2％肝素生理盐水）。 3．将动脉插管内血液及生理盐水放净，向试管 内各注入2mL左右新鲜兔血（试管上标号编 号和刻度），开始计时，并用拇指堵住管口 倒转2次，使血液与试管内容物相混。 4．自血液注入试管后每隔60s将各试管轻轻倾斜 一次（倾斜45度角），观察其中的血液是否 已凝固，发现其中的血液已呈凝胶状而不再 流动时记录其时间。如超过30分钟血液仍未 凝则视为“不凝”。 5．以第一管的凝血时间为对照，比较其余各管 的凝血时间有何变化。 6．最后向第7管内加入10%氯化钙溶液1滴，观 察管内血液是否凝固。 实验步骤 表5-3 影响血液凝固的理化因素实验结果 序号 实验条件 凝血时间（min） 1 干燥空白试管 4分30秒 2 加纱布少许 4分钟 3 用石蜡油润滑 4分30秒 4 37℃水浴 3分50秒 5 0℃冰浴 14分钟 6 肝素100ul 不凝 7 草酸钾100ul 不凝，加CaCl2后10分钟 2. 比较不同处理因素对血液凝固的影响，结合思考题（p91）分析原因，写实验报告。 1. 填写表5-3 实验后处理 1.实验前试管上做好实验标记、刻度标记。做好 分工（放血、接血、计相互配合好）。 2.取血前，要先将动脉插管内的血液及生理盐水 放净，再取新鲜血液进行后续试验。 3.血液加入试管后立即混匀、计时。 4.判定凝血的标准以试管倾斜45度，试管内血液 不流动为准，仔细观察结果，记录凝血时间。 5.各试管应保持基本条件（试管口径、血量、温 度）一致。不要人为地手握加温或反复摇动， 以防外部条件影响实验结果。 注意事项 红细胞渗透溶血实验 家兔动脉血2ml，按表5-4滴入红细胞悬 液1-2滴，轻轻摇匀 1 10 10支不同浓度NaCl溶液试管（低 高） 静置30分钟 实验步骤 教师示教 完全溶血 管内液体完全红色透明 部分溶血 上层红色透明 下层红色不透明(混浊) 不溶血 上层浅黄色或无色透明 下层红色不透明 记录刚开始出现部分溶血及完全溶血时NaCl溶液浓度 结果观察 下次实验: 家兔呼吸运动的调节预习要点：1. 掌握呼吸运动的实验方法,各种理化因素 对呼吸运动的影响及其原理。2. 熟悉Medlab生物信号采集处理系统的实验 记录和实验结果处理方法。 预习要求 PF3 Ca2+ V 内源性凝血 外源性凝血 XII XIIa 接触异物 XI XIa IX IXa PF3 Ca2+ VIII X Xa Ⅲ Ⅶ Ca2+ 组织损伤释放 X 凝血酶原激活物形成 凝血酶形成 纤维蛋白形成 II IIa 纤维蛋白原 纤维蛋白 稳定的纤维蛋白多聚体 XIIIa 4ML离心试管 200UL一次性枪头 在试管2ML处划一条黑线 避免放血时不好操作 试管内放碎布样本 注意大概数量 冰浴示意图 * 肝素 肝素是一种酸性粘多糖，主要由肥大细胞产生，几乎存在于所有组织中，尤以血浆、肺和肝中含量最多。肝素与/AT-Ⅲ结合后，可使后者与凝血酶的亲合力增强约/100 倍，并使两者结合得更快，更稳定，从而使凝血酶失去活性。此外，肝素尚能抑制凝血酶原的激活。在一定条件下肝素还能抑制血小板发生粘着、聚集和释放反应，使血小板内凝