实验十果蔬中维生素C的测定(2.doc

PAGE PAGE 1 实验十：果蔬中维生素C的测定（2，6—二氯靛酚滴定法） 教学目的要求 基本知识点 1、了解从果蔬中提取VC的方法。 2、掌握2，6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的原理、基本过程和操作关键。 3、熟练采样、样品处理、称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。 4、掌数据处理和结果计算技术。 重点 2，6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的基本过程和操作关键。 难点 2，6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的原理 课时教学方案： 复习与提问： 1、2，6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的原理。 2、2，6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的基本过程和操作关键。 3、检查学生实验准备情况。 【引入新课】 VC在人体内的主要功能是：参加体内的氧化还原过程，促进人体的生长发育，增强人体对疾病的抵抗能力，促进细胞间质中胶原的形成，维持牙齿、骨骼、血管和肌肉的正常功能，增强肝脏的解毒能力。当人体中缺少VC时，就会出现牙龈出血、牙齿松动、骨骼脆弱、粘膜及皮下易出血、伤口不易愈合等症状。近年来，科学家们还发现，VC能阻止亚硝酸盐和仲胺在胃内结合成致癌物质—亚脱胺，从而减低癌的发病率。 据测定，成年男子每天约需VC 65 mg，成年女子每天约需VC 60 mg。 VC广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是猕猴桃、鲜枣、草莓、枇杷、橙、橘、柿子等含有丰富的VC。以100g水果的VC的含量来计算，猕猴桃含420mg，鲜枣含380mg，草莓含80mg，橙含49mg，枇杷含36mg，橘含30mg，柿子含30mg。但葡萄、无花果、苹果各自只有5mg，香蕉、桃子各含10mg，梨子仅含4mg 实验十：果蔬中维生素C的测定 —2，6—二氯靛酚滴定法 维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，缺少它时会产生坏血病，因此又称为抗坏血酸（ascorbic acid）。化学名称为：L-3-氧代苏己糖醛酸内酯【英文名：Ascorbic Acid(INN)】，分子式为 C6H8O6 ，相对分子质量：176.13。自然界存在两种形式的维生素C：抗坏血酸（还原型VC）和脱氢抗坏血酸（氧化型DHVC）, 抗坏血酸易氧化成脱氢抗坏血酸，脱氢抗坏血酸又易还原成抗坏血酸。，脱氢抗坏血酸水解后生成二酮古乐糖酸，失去抗坏血酸的生理活性。 图1　维生素C的构造式及其氧化还原 异抗坏血酸是抗坏血酸的异构体,化学性质与抗坏血酸相似,易被吸收，但几乎没有抗坏血酸的生理活性（仅约二十分之一)。异抗坏血酸和抗坏血酸棕榈酸酯只用作抗氧化剂，防止食品变质、水果变色以及腌肉。 VC是无色晶体，属于水溶性维生素，易溶于水，水溶液呈酸性。在酸性溶液中稳定，在中性或碱性溶液中易被氧化分解，遇热极易破坏。具有较强的还原性，易氧化，铁、铜等金属离子能够加速其氧化速率。 一、实验目的 通过本实验加深对2，6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中维生素C的原理的理解，掌握其操作要点，熟练基本操作技术。 二、实验原理 2、6—二氯靛酚是一种染料，其颜色反应表现为两种特性。一是取决于氧化还原状态，氧化态为深蓝色，还原态为无色；二是受其介质酸度的影响，在碱性介质中呈深蓝色，在酸性溶液介质中呈浅红色。 用蓝色的碱性染料标准液，滴定含VC的酸性浸出液，染料被还原为无色，到达终点时，微过量的2、6—二氯靛酚染料在酸性溶液中呈浅红色即为终点。从染料消耗量即可计算出试样中还原型抗坏血酸量。 AA+氧化型染料(碱性)→DAA+还原型染料 （蓝色） （浅红色） 还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚（DCPIP），本身则氧化为脱氢型。在酸性溶液中，2,6-二氯酚靛酚呈红色，还原后变为无色。因此，当用此染料滴定含有维生素C的酸性溶液时，维生素C尚未全部被氧化前，则滴下的染料立即被还原成无色。一旦溶液中的维生素C已全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液变成粉红色。所以，当溶液从无色变成微红色时即表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化，此时即为滴定终点。如无其它杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含还原型抗坏血酸量成正比。 本法用于测定还原型抗坏血酸，测定总抗坏血酸含量常用2,4-二硝基苯肼法和荧光分光光度法测定。 想一想：测定原理明白吗？ 想一想：测定原理明白吗？ 三、材料 猕猴桃、黄瓜、卷心菜各500g 四、仪器： 1、研钵 (1个/2组) 【代替高速组织捣碎机:8000 r/min～12000r/min】 2、扭力天平（感量0.01g） 3、小刀（4把/班，合用） 4、50mL移液管（2支/全班） 5、500mL、50mL烧杯（2个//2组） 6、胶头吸管（1支/组） 7、100mL容量瓶（1个/组） 8、细玻璃棒（1支/组）