第六篇 植物胚培养.ppt

第六章 植物胚培养 第六章 植物胚培养 本章教学目的与要求 (1)了解植物胚培养的类型 (2)掌握胚培养的方法和操作步骤 (3)了解常见植物胚培养的技术 第一节 胚培养的类型和意义 一、植物胚培养的类型 胚培养主要包括成熟胚培养、幼胚培养两类。 1. 成熟胚培养 成熟胚分离出来，进行培养 2.幼胚培养 二、 胚培养的意义 1.克服远缘杂种的不育性 远缘杂交，在杂种幼胚发生败育之前取出，进行离体培养，获得杂种植株。 2.打破种子休眠 在休眠期，取出，离体培养，产生植物。 3.提高种子发芽率 植物胚珠发育不完全，发芽率极低，胚培养，提高发芽率 4.克服珠心胚的干扰 植物具有多胚现象，不定胚使合子胚发育受阻，影响杂交育种效率，合子胚分离培养，提高育种效率。 5.诱导胚状体及胚性愈伤组织 利用幼胚等离体培养，产生次生胚状体，和胚性愈伤组织。 6.种子生活力测定 木本植物种子，层积处理后，胚离体培养，测定生活力。 胚状体与合子胚的比较: 第二节 胚培养的方法 主要介绍 一、成熟胚培养方法 1.成熟胚培养： 在无菌的条件下，采用人工的方法将成熟胚分离出来，进行培养，让其进一步生长发育，以至形成幼苗的过程。 2.成熟胚培养的目的 （1）研究种子萌发时胚乳与胚的关系 （2）胚乳对幼苗初期生长的营养作用 （3）研究成熟胚生长发育过程的形态建成 （4）各种生长物质对形态建成的影响 （5）打破种子休眠，缩短育种周期 3.成熟胚培养的程序 （1）选果实或种子作为外植体 （2）表面消毒 （3）无菌条件下切开果实，取出种子 （4）胚的剥离 （5）培养基培养：MS、White培养基。 4.成熟胚培养条件下 （1）因成熟胚本身含有较多的营养条件，对培养基要求不高 （2）只含有大量元素和糖的培养基上，便可萌发成苗 （3）多数植物成熟胚的生长以12h/天光照为宜。 牡丹成熟胚的离体培养 以‘凤丹白’成熟胚为外植体 结果表明： （1）打破成熟胚休眠最适宜的预处理是4℃沙藏。 （2）成苗培养时的最佳的培养基是MS＋6-BA0.2mg/L＋IBA1.0mg/L。 （3）最适宜的生根培养基是MS＋IAA1.0mg/L 。 二、幼胚培养方法： 幼胚培养：在无菌的条件下，将未成熟胚分离出来，进行培养发育，以至形成幼苗的过程。 1、幼胚培养过程： 取子房 常规表面消毒 解剖镜下，取胚珠、去珠被、取出完整幼胚。 固体培养基培养 3、胚柄 A 在幼胚培养中，带有胚柄结构有利于幼胚的生长。 B 但一般较难与胚一起分离出来。 4、幼胚的发育方式： （1）胚性发育:幼胚接种培养基,发育成成熟胚. （2）早熟发育:幼胚接种培养基,不进行胚性发育,萌发成幼苗. （3）产生愈伤组织:幼胚接种培养基,发生细胞增殖,形成愈伤组织. 三、胚乳培养 胚乳外植体制备:种子消毒---取出胚乳 培养:White或MS诱导培养基---25-27℃--暗或弱光 发育:诱导形成愈伤组织----再分化形成胚状体或不定芽---生根培养----植株。 2、胚乳培养基与培养条件 3、胚乳再生植株的染色体倍数 稳定型：三倍体 畸变型：除少数是三倍体，多数是由多种倍性细胞组成的嵌合体 4、胚乳培养的应用 四、胚珠培养方法 1、胚珠培养 定义：是指将胚珠从母体上分离出来，在无菌的人工环境条件下培养，使其生长发育形成幼苗的过程。 2、胚珠培养类型： 4、胚珠培养的应用 五、子房培养 1、定义：子房培养是指将子房从母体上分离出来，在无菌的人工环境条件下培养，使其生长发育形成幼苗的过程。 2、子房培养的培养过程 （1）、制备外植体：在开花前后适宜时期取子房或幼花，消毒 （2）、子房培养：固体或液体培养均可 性细胞（卵细胞、助细胞、极核、反足细胞）----胚状体或愈伤组织----单倍体植株； 体细胞（珠被、子房壁）---胚状体或愈伤组织----二倍体植株； 4、子房培养的应用 A、授粉子房培养目的：挽救杂种胚 B、未授粉子房培养目的：获得单倍体植株。 第三节 常见植物胚培养技术 1、成熟胚培养过程---以玉米成熟胚培养为例 (1) 玉米种子消毒 (2) 在黑暗条件下，将种子放在无菌湿润的含滤纸的培养皿中培育6hr。 (3) 将吸涨的种子在无菌培养皿内将胚分离出来 (4) 无菌水冲洗3次 (5) 在MS培养基中暗培养。 (6) 观察：2d出现胚根，3-4 d出现胚芽，10d长成幼苗。 3、番茄的胚培养 4、苹果胚培养 (1)、取材消毒：取授粉30～50d内的幼果，用70%酒精擦拭。取出种子，剥出幼胚或成熟胚。 (2)、启动培养：接种在BA0.25+IAA0.