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mRNA:(messenger)编码了一个或多个蛋白质序列; tRNA:(transfer)把mRNA上的遗传信息变为多肽中的氨基酸信息; rRNA:(ribosomal)是合成蛋白质的工厂核糖体中的主要成分。 hnRNA:(heterogeneous nuclear)由DNA转录生成的原始转录产物,即前体mRNA。 转录的终止 合成的终止: 当RNA链延伸到转录终止位点时,RNA polymerase 和RNA链均从DNA模板上释放出来。 Terminator: 通常含有自我互补区域(self-complementary regions) ,在RNA产物中可以形成stem-loop 或hairpin结构 。 转录与DNA复制的异同 ?? 相同点: 合成反应的化学本质 模板的使用 合成的方向 发生的部位 不同点:?? (1)转录:一条DNA链为模板 复制:两条链都可作模板; (2)DNA-RNA杂合双链不稳定,RNA合成后释放,而DNA复制结束后,新链和母链形成双链; (3)RNA合成不需引物,而DNA复制需引物; (4) 转录的底物是rNTP,复制的底物是dNTP;碱基由复制时的T替换为转录时的U。 (5)聚合酶系统不同。 有义链的确定 把与mRNA序列相同的那条DNA链称为编码链(coding strand)或称有意义链(sense strand)(+); 把另一条根据碱基互补原则指导mRNA合成的DNA链称为模板链(template strand)或称反义链(antisense strand)(-)。 在体外DNA的两条链都可作为RNA合成的模板。 转录的基本特点: (1)以核糖核苷三磷酸(rNTP)为底物,以Mg2+/Mn2+为辅助因子; (2)仅以一条DNA链为模板; (3)按5′ 3′方向合成; (4)无需引物的存在能单独起始链的合成; (5)第一个引入的rNTP是以三磷酸形式存在; (6)RNA的序列和模板是互补的。 (7)需要RNA聚合酶和多种辅助因子参与。 第二节 转录机器的主要成分 在动、植物及昆虫的细胞中,RNA Pol Ⅱ的活性可被低浓度的α-鹅膏蕈碱所抑制。但却不抑制pol Ⅰ。 Pol Ⅲ对α-鹅膏蕈的反应,不同的生物有所差异。在动物细胞中高浓度的α-鹅膏蕈可抑制转录,在昆虫中不受抑制。 真核生物RNA聚合酶的亚基 模板DNA进入转录复合体的路径 DNA的转录循环假说transcription cycle——translocation mechanism 第三节 启动子与转录的起始 启动子的结构 (1)结构典型,都含识别(R),结合(B)和起始(I)位点; (2)存在保守序列; (3)保守序列的位置和距离都比较恒定; (4)与多聚酶相结合; (5)位于基因的5′端; (6)决定转录的起始和方向。 1. -10序列: -10序列是由Pribnow和Schaller(1975)发现,故也称为Pribnow框盒(Pribnow box)。 保守序列为T80A95T45A60A50T96 位于-10bp左右,A T较丰富,易于解链。其功能是: (1) RNA pol紧密结合; (2) 形成开放起始复合物; (3) 使RNA pol定向转录。 2. -35序列 -35序列又称为Sextama盒(Sextama box), 其保守序列为(T82T84G78A65C54A45) 其功能是: (1) 为RNA pol的识别位点。 σ亚基识别-35序列,为转录选择模板 (2)-35和-10序列的距离是稳定的,此与RNA pol的结合有关。 4. 转录起始位点(I) 转录开始时模板上的第一个碱基 在原核中常为A或G 而且位置固定 典型启动子的结构 -35 -10 转录起点 TTGACA 16-19bp TATAAT 5-9bp 三、酶与启动子区的结合 1.全酶与模板的DNA接触,生成非专一的,不稳定的复合物; 2. 起始识别:全酶与-35序列结合,产生封闭的酶-启动子二元复合物; 3.全酶紧密地结合在-10序列处,模板DNA局部变性,形成开放的启动子二元复合体;解链区:-9~+13 四、增强子 它是在1981年由Benerji, Rusconi小组和Chambom等发现的,其特点是: ① 具有远距离效应。 ② 无方向性。 ③ 顺式调节。 ④ 无物种和基因的特异性。 ⑤ 具有组织的特异性。 ⑥ 其作用和DNA的构象有关。 ⑦ 有
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