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细胞生物学实验 实验三 细胞膜的通透性 一、实验目的与要求 1. 掌握细胞膜通透性的实验方法。 2. 观察并掌握相对分子量、脂溶性大小、电解质和非电解质对细胞膜通透性的影响。 二、实验原理 细胞膜在不断变化的环境中必须保持自身的稳定状态才能生存。细胞膜允许一些物质通透,又能降低甚至阻止另一些物质的通透,所以细胞膜具有选择通透性。 二、实验原理 血红蛋白从红细胞中逸出的现象称为溶血现象。 三、实验材料、仪器和主要试剂 1. 材料:含适量肝素的兔血。 2. 实验仪器 小烧杯,试管,试管架,刻度吸管,注射器,秒表等。 3. 试剂 乙二醇、丙三醇、葡萄糖;甲醇、乙醇、丙醇等。 四、实验方法与步骤 1 .相对分子质量大小对膜通透性的影响 在编号的三支试管中,分别加入2ml的1mol/L 等摩尔浓度的乙二醇、丙三醇、葡萄糖高渗液,分别滴加两滴血液,用手腕轻轻摆动,晃动试管观察溶血时间,最长延长至15分钟,记录溶血时间、实验结果。 四、实验方法与步骤 2 . 脂溶性大小对细胞膜通透性的影响 在3 支试管中,各加入3mol/L甲醇、乙醇、丙醇溶液2ml 后,分别滴加血液2 滴,轻轻摇动试管并观察溶血现象,记录各管的溶血时间。 四、实验方法与步骤 3 . 电解质和非电解质对细胞通透性的影响 在16 支试管中,各加入不同浓度的葡萄糖及氯化钠溶液2ml 后,分别滴加血液2 滴,轻轻摇动试管,室温放置15min,观察发生溶血的浓度,确定等渗浓度,并计算等渗摩尔系数。 五、注意事项 1. 溶血现象可用一张有字的白纸来辅助识别,能够清楚地透过溶液看到溶液后方纸上清晰的字迹时,为完全溶血。 2. 因相对分子质量大小对膜通透性有影响,所以将溶血时间适当地延长至15min,15min时 仍然不溶即判断为不溶血。 3. 注意同组实验过程的同步性,尤其滴加血液的操作要迅速。 * * 广东药学院 生命科学与生物制药学院 未溶血 溶血 渗入红细胞的溶质能提高红细胞渗透压,使水进入红细胞,引起溶血及细胞膜破裂。此时光线较容易通过溶液,使溶液呈现透明即溶血。 二、实验原理 在不同相对分子量、脂溶性大小以及电解质和非电解质等各种溶液中, 红细胞质膜对各种溶质的渗透性不同。由于溶质透入速度不同,溶血时间也不同。因此,通过观察红细胞溶血现象时间的不同来记录渗入速度,从而测量各种物质通透性的差别。 * *
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