编码山羊补体C3d及口蹄疫病毒VP1融合蛋白重组质粒的构建及表达.pdf

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生 物 工 程 学 报 Chin J Biotech 2008, February 25; 24(2): 209-213 journals.im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@im.ac.cn © 2008 Institute of Microbiology, CAS CSM, All rights reserved 研究报告 C3d VP1 1, 2 1, 2 3 1, 2 4 1, 2 1, 2 凌洁玉 , 刘朝 , 佟铁铸 , 樊惠英 , 张德坤, 陈焕春 , 郭爱珍 1 , 430070 2 , 430070 3 , 516001 4 , 830001 : 旨在构建含分子佐剂山羊补体C3d 基因的O 型口蹄疫病毒VP1 基因真核表达质粒。克隆山羊 C3d 基因, 通过 linker(G S) 将 3 拷贝C3d基因串联; 克隆羊源O型口蹄疫病毒VP1 基因, 通过linker(G S) 与 3 拷贝C3d基因相连, 构 4 2 4 2 建重组质粒pUC19-VP1-C3d 3 。将VP1-C3d 3 融合基因亚克隆入含有分泌表达信号肽tPA序列的pcDNA3.1(+)CMV 启动 子下游, 构建重组真核表达质粒pcDNA3.1-tPA-VP1-C3d 。在脂质体介导下, 将pcDNA3.1-tPA -VP1-C3d 转染HeLa 细 3 3 胞。间接免疫荧光分析表明, VP1- C3d3在HeLa 细胞中获得了瞬时表达, Western blot分析证实转染的阳性细胞能分泌预 期大小(133 kD) 的融合蛋白。重组质粒pcDNA3.1-tPA-VP1-C3d 3 为研制以羊补体C3d为分子佐剂的口蹄疫新型疫苗奠 定了基础。 : 山羊C3d, 口蹄疫病毒VP1 基因, 分子佐剂, 真核表达 Construction and Eukaryotic Expression of Recombinant Plasmid Encoding Fusion Protein of Goat Complement C3d and Foot-and-Mouth Disease Virus VP1 1,2 1,2 3 1,2 4 1,2 Jieyu Ling , Zhao Liu , Tiezhu Tong , Huiying Fan , Dekun Zhang , Huanchun Chen , and Aizhen Guo1,2 1 The State Key Labora

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