生物质谱分析技术 胡水旺课件.ppt

生物质谱分析技术;第一部分;生命科学研究的目标;声酿芹神亡迢刀位飘淌右灾赏字淬掂道粒叙泅拆令播绒睡踏宵鲍柄斧桑亭生物质谱分析技术 胡水旺课件生物质谱分析技术 胡水旺课件;对生命的认识;镊脾诸令缆返犊厉友葡勒缮涪躇幸界凰芬龟呕淄盛你胚斯妊咐锄滑喧拖绑生物质谱分析技术 胡水旺课件生物质谱分析技术 胡水旺课件; 系统生物学;Reductionism vs Synthesis;荐脖览赖栖绰嗡眉怎蘸萤留堰傲实融挪泌勉蜒窝名诀狭渣屿包康掳借涧怕生物质谱分析技术 胡水旺课件生物质谱分析技术 胡水旺课件;第二部分 ;解析疾病机制手段的改进:DNA Protein ; 蛋白质表达调控;蛋白质研究的复杂性;传统的蛋白质研究方法中存在的问题; 随着人类基因组计划重点由结构基因组到功能基因组的转移，生命科学开始进入后基因组时代。 研究基因终产物及生命活动直接功能执行者蛋白质的科学-蛋???质组学（Proteomics）应运而生。;;;; 蛋白质研究技术的革命：蛋白质组学;蛋白质组学常用的两大技术平台;缔洒炳咯睹饱蕴话闪憨齐加迈钡讲劲诺凡邱勇锗隋塘击梢苛变穆建庐职锡生物质谱分析技术 胡水旺课件生物质谱分析技术 胡水旺课件;;第三部分;质谱技术特点;质谱分析原理;质谱发展史;生物质谱的发展;质谱仪的示意图;质谱工作流程;质谱的构造;进样系统;离子源;1).电子轰击(Electron impact, EI)电离 M + e- M+. + 2e- ;2). 化学电离(chemical ionization, CI) 正离子模式：GH+ + M [M + H]+ + G 负离子模式：[G-H]- + M [M - H]- + G ;3). 快原子轰击(Fast atom bombardment, FAB)离子化技术-可分析分子量达数千的多肽, 极性分子.;4). 电喷雾离子化(Electrospray ionization, ESI)技术; 电喷雾离子化（Electrospray Ionizsation，ESI）是在毛细管的出口处施加一高电压，所产生的高电场使从毛细管流出的液体雾化成细小的带电液滴，随着溶剂蒸发，液滴表面的电荷强度逐渐增大，最后液滴崩解为大量带一个或多个电荷的离子，致使分析物以单电荷或多电荷离子的形式进入气相。;电喷雾离子化的特点是产生高电荷离子而不是碎片离子，使质量电荷比（m/z）降低到多数质量分析仪器都可以检测的范围，因而大大扩展了分子量的分析范围，离子的真实分子质量也可以根据质荷比及电荷数算出 可以方便地与多种分离技术联合使用，如液一质联用（LC－MS）是将液相色谱与质谱联合而达到检测大分子物质的目的。;5). 基质辅助激光解吸电离(Matrix-assisted laser desorption/ionization, MALDI)技术，N2 (337nm);;MALDI Matrix 应具有的特性 能够嵌入样品分子间并能起到隔离样品分子之间的相互作用(如形成共结晶); 能溶解于可溶解样品分子的溶剂; 在真空状态下是稳定的; 可吸收激光,既与激光形成共振吸收; 可激发样品分子离子化. ;样品引入方式：直接进样 优点： a). 快速获得分子量的信息; b). 快速获得混合肽的肽谱. 缺点: a). 金属离子干扰, Na, K； b). 离子源结构复杂,； c). 没有LC/MALDI 接口； d). 实现MS/MS 困难 e). 需要基质 质量范围: 分子量小于500,000 Da;6). 表面增强激光解吸电离(Surface-enhanced laser desorption/ionization, SELDI)技术;adding the protein sample, washing, adding the energy adsorbing molecule (EAM) ;质量分析器;1). 磁质谱仪 (magnetic-sector mass spectrometer) 经典质量分析器：带电粒子在磁场中运动受到洛伦兹力的作用; 优点：a). 高重现性(稳定性); b). 最好定性分析工