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链球菌常规检验 标本采集 根据临床标本不同采集不同标本 检验方法—直接镜检 方法:取标本直接涂片,革兰染色后镜检 初步报告: “查见革兰阳性球菌” “查见革兰阳性矛尖状双球菌，有荚膜，疑似肺炎链球菌” 荚膜肿胀试验可确诊， “找到肺炎链球菌” 检验方法—分离培养 脓、痰、脑脊液标本－→接种血平板，进行分离培养 菌落特征： 甲型链球菌：针尖样菌落、周围有草绿色溶血环； 乙型链球菌：灰白色小菌落、周围有透明溶血环； 丙型链球菌：灰白色菌落、无溶血环 肺炎链球菌：灰白色扁瓶小菌落、周围有草绿色溶血环，培养较久形成脐窝样菌落 检验方法—增菌培养 增菌培养基：葡萄糖肉汤、硫酸镁肉汤 血液与培养基比例：1：10，即5ml标本，50ml增菌液。 拮抗剂：硫酸镁（拮抗多种抗生素）、对氨基苯甲酸（拮抗磺胺）等 培养时间： 常规培养：18～24小时至1周； 亚急性细菌性心内膜炎：观察7天至1月 链球菌鉴定 细菌形态及染色性 菌落特征 鉴定试验 杆菌肽敏感试验 CAMP试验 胆汁七叶苷试验 Optochin敏感试验 血清学分群快速胶乳凝集试验 肺炎链球菌与甲型链球菌的鉴别 乙型溶血性链球菌的鉴定 β-溶血环 包括A、B、C、D、F、G群 C群可采用血清学鉴定 其它群采用生化反应或其他鉴定试验 非β-溶血性链球菌鉴定 包括 肺炎链球菌 牛链球菌 无乳链球菌 草绿色链球菌 营养变异链球菌 草绿色链球菌鉴定 α溶血或不溶血，胆汁七叶苷阴性，包括 变异链球菌群 唾液链球菌群 血液链球菌群 咽峡炎链球菌群 鉴定依据 A群链球菌－－杆菌肽敏感试验（+） B 群链球菌－－CAMP试验（+）、马尿酸钠水解试验（+） D群链球菌－－胆汁七叶苷（+）、6.5％氯化钠生长（－） 肺炎链球菌－－Optochin敏感试验（+）、胆汁溶菌试验（+）、形态和菌落特征典型 甲型链球菌－－ Optochin敏感试验（－）、胆汁溶菌试验（－） 肠球菌 革兰阳性球菌，短链排列 营养要求高 在10℃、45℃、pH9.6条件下均可生长 血平板上溶血现象不定 触酶试验（-） 胆汁七叶苷试验（+） 6.5％NaCl生长试验（+） PYR试验（+） 血清学分类属D群 肠球菌临床意义 引起的医院感染仅次于葡萄球菌 肠球菌感染以粪肠球菌为主 以尿路感染多见 有不同程度耐药 肺炎链球菌电镜图 肺炎链球菌光镜图 肺炎链球菌Gram’s染色镜检图 * * 细菌鉴定的基本程序 标本 直接涂片 革兰染色镜检 分离培养 取可疑菌落 鉴定试验和药敏试验 结果报告 脓、痰、咽拭 脑脊液 血液 增菌培养 分离培养 直接涂片染色 观察菌落及溶血现象 触酶试验（－） Optochin 敏感试验 肺炎 链球菌 草绿色 链球菌 杆菌肽 胆汁 七叶苷 A群 链球菌 D群 链球菌 肠球菌 6.5％ NaCl 血清学 分类 － － － － 针尖状、草绿色溶血环 圆形、短链、无荚膜 甲链 + +/－ + + 脐窝状、草绿色溶血环 矛尖状、成双排列、有荚膜 肺链 小白鼠 毒力 菊糖 分解 Optochin 胆汁 溶菌 菌落 形态 菌名 胆汁溶菌试验 * * * * *