利用壳聚糖微球制备固定化乙酰胆碱酯酶.pdf

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2017-05-31 发布于河南
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利用壳聚糖微球制备固定化乙酰胆碱酯酶

27 4 Vol. 27, No. 4 2011 4 POLYMER MATERIALS SCIENCE AND ENGINEERING Apr. 2011 张爱静, 孟范平 ( , 266100) : 以壳聚糖微球( CSMS) 为载体, 戊二醛( GA) 为交联剂, 制备固定化乙酰胆碱酯酶(AC E) 通过测定各种件对酶活回收率影响,确定适宜的固定件为: 将1 g CSMS 用5 mL 体积分数0. 5% 的 GA 活化025 , 然后加到含075 U AC EpH 70~ 75 的PBS 中振荡反应24 所得到的酶活回收率可达81. 94% , 优于同类研究水平红外光谱分析证实, AC E 通过共价键和氢键结合到载体上扫描电镜观察表明, 经活化后CSMS 呈蜂窝状且表面平整光滑, 利于酶的固定因此, CSMS 是一种很有潜力的固定AC E 载体 : ; ; ; : O636. 1 :A :2011) ( AC E, EC3. 1. 1. 7) , AC E T 6 : , ; DL5B : ; A [ 1] CNBr Sep arose 4B VATAR360 : Nicolet ; [ 2] AC E , KYKY2800B : , ; HZSH : ( CS) - OH- NH , 2 , 1. 2 CSMS [3] ( CSM S) CS [ 4] Denkbas , , 500 mL 20 mL span80 , CSMS , , 250 mL 2% CS ( 2% GA - CHO, AC E ) , 30 min, 20 mL 2. 5% - NH Sc iff , 2 GA 1 , , , , CSMS, 4 , AC E 1. 3 AChE 1. 000 g CSMS, 5. 0 mL GA 1 , 1. 1 ( 1 U/ mL) Tw een20, 4 ( CS) : , , PBS( 01 mol/ L, pH 75) 96. 7% ; AC E: Sigma , 01 mol/ L Tween20, 4 PBS PBS ( pH 75) ; : ATC I, Fluka ; 5, 5( 2) 1.