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微生物实验 新疆师范大学 生物技术09-7 张经博 实验1 培养基的制备 一、 实验器材 二 、仪器和其他用品 三 、目的要求： 1.学习掌握培养基的配制原理。 2.通过对这几种培养基的配制，掌握配制培养基的 一般方法 四、操作步骤：高氏Ⅰ号的制备 1.称量和融化 2.PH调节、分装、包扎、灭菌 配制高氏一号培养基 实验2 稀释涂布平板法与平板分离技术 一、实验器材 1.土壤样品 2.培养基高氏Ⅰ号，牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，马丁氏培养基 二、目的要求 1.掌握到平板的方法和几种常用的分离纯化微生物的基本操作技术。 2.掌握平板分离技术 三、操作步骤 1.倒平板 2.制备土壤稀释液 3.涂布 4.培养 实验3 平板划线分离法 一、操作步骤 1.倒平板 2.划线 二、实验结果：得到单菌落 实验4 革兰氏染色 操作步骤 1.制片 2.初染 3.媒染 4.脱色 5.复染 6.镜检 实验结果：菌种被染成红色，菌种为革兰氏阳性菌 实验4 革兰氏染色 染完为阳性菌 革兰氏染色为阳性 且菌体为单一形态 （杆状） 可断定纯化合格 能进行下阶段试验 实验五、放线菌、霉菌和酵母菌形态的观察 实验目的： 学习丝状微生物制片和染色技术； 观察和掌握典型放线菌、重要霉菌和酵母菌的形态结构特征 一、实验材料 1、细黄链霉菌5406平板、插片培养材料。 2、黑曲霉、青霉、毛霉平板培养材料和湿室培养材料。 3、黑根霉（面包霉）装片 4、酿酒酵母菌菌液 放线菌的形态结构 是一类具有丝状分枝细胞的革兰 阳性菌，因菌落成放射状二得名 放线菌的形态和大小 放线菌呈分枝丝状 菌丝无隔膜，单细胞 菌丝直径与细菌相似，小于1微米 放线菌菌丝形态和功能 菌丝形态和功能的不同，放线菌菌丝可分为基内菌丝、气生菌丝和孢子丝三种 放线菌的培养与观察方法 插片法-水封片法 玻璃纸法 压片法 影印法 实验六 食用真菌的培养 二、目的要求 理解使用真菌多种多样的培养方式。学习一种食用真菌的母种或原种或栽培种的培养技术，并掌握其基本的知识和技术方法 三、基本原理 食用真菌全部都是化能自养型，各种现成的有机物能满足起生长的需要，根据食用真菌的不同需要，来配置培养基， 四、操作步骤 食用菌的栽培 将棉籽壳培养基转入塑料袋中压实，用小棒在中央扎一直径为1.5CM的孔，121度灭菌90分钟 将培养基温度降至20-30度时，移到无菌操作台进行接种 栽培管理 发菌：即菌丝在营养机制中向四周的扩散的伸长期，室温控制在20-23度相对湿度70%-75%。 珊瑚期：原基分化形成菌柄菌盖尚未形成 茹蕾形成期：菌盖已经形成开始出现菌皱 采收期：出现一批菇蕾，既要立即不留茬基采收 实验结果 实验7 大分子物质的水解（一） 实验器材 1.菌种 自己培养的菌种 2.培养基 固体油脂培养基，石蕊牛奶试管，琼脂脂试管，明胶培养基试管，石蕊牛奶试管，尿素琼脂试管， 3溶液和试剂 革兰氏染色用卢氏碘液等。 二、目的要求 证明不同微生物对大分子物质水解能力不同，从而说明不同微生物有不同的酶系统。 一、油脂水解实验 试验后平板出现红色斑点 说明脂肪被水解，为阳性反应。 淀粉水解实验 菌苔出现无色透明圈，说明淀粉已经水解，为阳性。 明胶水解实验 发现明胶试管液化为阳性菌种 石蕊牛奶实验 石蕊在酸性条件下为粉红色 实验八 糖发酵实验 试管由紫色变为黄色 说明此菌种课一产酸，德汉氏小管无气泡说明此菌种不产气。 实验九 IMVIC 实验 （1）甲基红实验 表明为阳性菌种 产酸能力强 实验九 IMVIC 实验 （2）柠檬酸盐实验 发现菌种没有变蓝或黄， 说明该菌种不能利用柠檬酸盐 为阳性菌种 V-P实验 阳性菌种 实验结果为红色 实验十 抗生素实验（1）氨苄青霉实验 实验结果表明菌种可以朝试纸方向生长表明菌种对氨苄青霉有抗性。 实验十 抗生素实验（1）青霉素实验 实验结果表明菌种不能朝试纸方向生长 ，表明菌种对青霉素无抗性。 实验十一 待鉴定菌的DNA提取 提取结果不是很理想， 谢谢 * * ﹪