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分子生物学复习题 第三章 基因的三种主要功能是什么？ 储存信息(转录，翻译);复制;突变 第四章 cDNA、基因克隆与核酸内切酶的概念（概念） （1） cDNA指与RNA链互补的单链DNA，以其RNA为模板，在适当引物的存在下，由RNA与DNA进行一定条件下合成的DNA。 （2）基因克隆一般指将外源基因导入宿主细胞中，分离含有外源基因的单细胞，然后由一个单细胞生长起来的都是含有外源基因的相同的细胞系。 （3）核酸内切酶是在核酸水解酶中，水解DNA分子链内部磷酸二酯键生成寡聚核苷酸的酶。 载体至少需要几个筛选标记各起什么作用？ 答：载体至少需要3个筛选标记。 作用分别为：1：指示自主复制的起点。2：指示载体进入宿主细胞。3：指示目的基因进入宿主细胞。 cosmid、质粒与噬菌体载体的区别？ Cosmid 噬菌体 质粒 宿主 Bacteria大肠杆菌 Bacteria Bacteria 插入片段的大小 Up to 50kb ~ 12-20 kb ~ 1-8 kb 进入细胞的方式 Transfection转染 Infection感染 Transformation转化 转入效率 高效 高效 一般 第五章 杂交的概念，Northern blot与Southern blot 的异同点（简答） 答：一条核酸单链在适宜条件下与另一条与之互补的核酸单链在适宜的条件下形成双链螺旋的现象叫做杂交。 异同点：Southern blot 是分析DNA的杂交技术，Northern blot是分析RNA的 Southern 和Northern原理基本相同，都是利用DNA或RNA的复性过程，但过程上也有区别，主要是： Southern是先电泳后变性，而Northern是先变性后电泳； Southern是碱变性，而Northern采用甲醛、乙二醛、二甲基亚砜等变性，因为采用碱变性会导致RNA水解。 第六章 转录、启动子、下降突变、上升突变？(概念 选择) 答：（1）转录是指拷贝出一条与DNA链序列完全相同（除了T→U之外）的RNA单链的过程，是基因表达的核心步骤。 （2）启动子（promoter）：一段RNA聚合酶转录起始时结合的DNA序列。 （3）下降突变：破坏与保守序列的匹配率，使启动子的转录活性减弱的突变。 （4）上升突变：使启动子的序列更接近保守序列而使启动子功能增强的突变。 原核生物启动子的基本结构？—郑炜鹏 答： 原核生物启动子在转录起始位点上游存在-10和-35两个区域中心。大写字母仅指在给定的位置该碱基的出现有较高的概率。小写字母相应的碱基在所给定的位置出现的频率较大写字母在其位置上的概率要低。 E.coli RNA聚合酶核心酶与全酶的区别？—郑炜鹏 答：大肠杆菌的RNA聚合酶全酶由5个亚基组成（α2β，βδ），没有δ基的酶叫核心酶。核心酶只能使已开始合成的RNA链延长，但不具有起始合成RNA的能力，必须加入δ基才表现出全部聚合酶的活性。 E.coli终止子的类型、结构特点与作用机制。—郑炜鹏 答：大肠杆菌细胞内含有两种终止子。 一种是没有其它蛋白帮助下的内在终止子。 第二种是依赖辅助因子ρ的终止子，叫做ρ依赖型终止子。 1内在的终止子结构 ： 大肠杆菌色氨酸（trp）操纵子含有一个导致提前转录终止的衰减序列。trp 衰减子具有两个元件（1）反向重复序列（2）非模板链富含一连串T的序列 2 ρ因子非依赖型终止子：ρ因子非依赖型或内在的终止依赖于终止子的两个元件：（1）富含GC的反向重复序列（2）基因非模板链紧随的富含T的序列。 ρ因子非依赖型终止子允许在转录末端形成发夹结构的反向重复序列；非模板链一连串的T使得rU-dA碱基对作用很弱。 第七章 操纵元、结构基因、操纵子、调控基因、终止子、效应物 正/负调控、弱化子（衰减子）—郑炜鹏 答：操纵元： 结构基因：负责编码细胞代谢途径中组成型蛋白质的基因。其所编码的蛋白质一般不作为调节因子。 操纵子：操纵子是指能被调控蛋白特异性结合的一段DNA序列，常与启动子邻近或与启动子序列重叠，当调控蛋白结合在操纵子序列上，会影响其下游基因转录的强弱。 调控基因：调控基因是编码能与操纵序列结合的调控蛋白的基因。 终止子：终止子是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列。 效应物：所谓效应物是指直接产生效应的物质,通常是酶,如腺苷酸环化酶、磷酸脂酶等,它们是信号转导途径中的催化单位。效应物通常也是跨膜糖蛋白。 正/负调控：负调控保证了乳糖操纵子在乳糖不存在时，处于关闭状态，而正调控保证了乳糖操纵子在葡萄糖存在时处于关闭状态，甚至在乳糖和葡萄糖一起存在时也处于关闭状态。 弱化子（衰减子）：RNA合成终止时，起终止转录信号作用的那段DNA序列。 （1）根据图示请写出乳糖操纵子各部分的