dna重组技的基本工具2.ppt

三、“分子运输车” ——载体 1 载体需要的条件： ⑴ 有1~多个限制酶切点 ⑵对受体细胞无害 ⑶导入基因能在受体细胞中复制、表达 ⑷有某些标记基因，便于筛选 2 常用运载体： ⑴细菌的质粒 ⑵λ噬菌体衍生物或某些动植物病毒。 常用的载体：质粒 能复制并带着插入的目的基因一起复制 有切割位点 有标记基因的存在，可用含氨苄青霉素的培养基鉴别 课堂练习： 在基因工程中，切割运载体和含有 目的基因的DNA片段，需使用（ ） A. 同种限制酶 B. 两种限制酶 C. 同种连接酶 D. 两种连接酶 A 课堂练习： 2.不属于质粒被选为基因运载体的 理由是 （ ） A、能复制 B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA D 课堂练习： 3.以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的 核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个 限制酶切点，以便与外源基因连接 D、基因控制的性状都能在后代表现出来 C 博客地址：/sred4487@126 优 联系作者：sred4487@126.com 秀 课 件 尽 在 帅 老 衲 * * * 专题一： 基因工程的应用： 2005年全世界约有糖尿病患者1.8亿,我国约6000万。 治疗糖尿病特效药——胰岛素。 每100kg 猪或牛的胰腺中仅可提取4~~5g。 1979年，美国将人的胰岛素基因重组到大肠杆菌内， 实现了细菌生产胰岛素，大大降低了生产成本。 DNA(基因)　　　mRNA 蛋白质(性状) 转录 翻译 思考：基因的表达与基因的什么过程有关？ 密码子在生物界是　　　的！ 通用 基因工程的产物： 多彩小鱼 转基因小鼠 转基因小猪 辣椒香蕉 蓝色玫瑰 黑籽番茄 基因工程的概念： 基因工程，又叫DNA重组技术。通俗的说，就是按照 人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加 以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向 地改造生物的遗传特性。 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 科技探索之路： 基础理论和技术发展催生了基因工程 早期基础理论 达尔文提出生物进化论 科技探索之路： 基础理论和技术发展催生了基因工程 早期基础理论 孟德尔提出基因的分离定律和自由组合定律 科技探索之路： 基础理论和技术发展催生了基因工程 早期基础理论 摩尔根证明基因在染色体上， 并提出基因的连锁互换定律。 科技探索之路： 基础理论和技术发展催生了基因工程 早期基础理论 艾弗里证明DNA是主要遗传物质，DNA可 从一种生物个体转移到另一种生物个体。 科技探索之路： 基础理论和技术发展催生了基因工程 早期基础理论 沃森、克里克提出DNA的双螺旋结构模型。 科技探索之路： 基础理论和技术发展催生了基因工程 早期基础理论 梅塞尔松、斯塔尔证明DNA的半保留复制 科技探索之路： 基础理论和技术发展催生了基因工程 早期基础理论 克里克等提出中心法则 DNA RNA 蛋白质 转录 翻译 逆转录 复制 科技探索之路： 基础理论和技术发展催生了基因工程 早期基础理论 1963年尼伦伯格和马太破译编码氨基酸的 遗传密码，1966年霍拉纳用实验加以证明。 科技探索之路： 基础理论和技术发展催生了基因工程 1)基因转移载体的发现 2)工具酶的发现 3)DNA合成和测序技术的发明 4)DNA体外重组的实现 5)重组DNA表达实验的成功 6)第一例转基因动物问世 7)PCR技术的发明 问题探讨： 苏云金芽孢杆菌含有一种可以合成毒蛋白的基因。 让细菌的毒蛋白基因在棉花细胞中表达，可培育出抵抗棉铃虫害的抗虫棉。 普通棉花　　抗虫棉 想一想：完成抗虫棉的培育，需要哪些关键工作？ 基因工程培育抗虫棉的简要过程： 普通棉花(无抗虫特性) 提取 抗虫基因 通过运载体导入 转基因棉花含抗虫基因 转基因棉花有抗虫特性 苏云金芽孢杆菌 转基因棉花产生伴胞晶体 思考：在以上过程中关键步骤或难点是什么？ 基因工程培育抗虫棉的关键步骤： 关键步骤一： 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 关键步骤二： 抗虫基因与棉花DNA“缝合” 关键步骤三： 抗虫基因进入棉花细胞 “分子手术刀”—— 限制性核酸内切酶 “分子缝合针”—— DNA连接酶 “分子运输车”——载体 一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀” 1 名称来源：限制性核酸内切酶，又称限制酶 主要从原核生物中分离纯化。 2 作用特点：识别特定核苷酸序列，使每条链中