低分子量肝素改善急性胰腺炎微循环障碍.ppt

低分子量肝素改善急性胰腺炎微循环障碍的实验研究 专 业 普通外科 研究生 王 强 * 前言 * 实验方法和材料 * 实验结果 * 结论 * 讨论 * 参 考 文 献 一、前 言 研究表明SAP早期即发生微循环障碍，并贯穿SAP的整个病程，是SAP的启动因子和持续损害因子，其中炎症因子和血管活性物质的过度释放更加重了SAP的微循环障碍[1，2]。所以改善胰腺微循环障碍有望成为治疗SAP的一种重要手段。 低分子量肝素（LMWH ）研究现状 LMWH作为一种很重要的抗凝、抗血栓药物 应用于临床。在治疗急性胰腺炎方面，许多实验研究表明LMWH可以降低炎症因子和血管活性物质的释放从而改善大鼠SAP模型的微循环障碍[3，4]。 胰腺微循环的影响因素 胰腺小叶多由独支小叶内动脉供给血液，相邻小叶内动脉之间及其分支之间无吻合存在，属终末动脉，所以小叶内动脉的痉挛、栓塞或压迫会造成胰腺小叶的缺血、坏死 ； 急性胰腺炎时大量细胞因子和炎性介质释放（如：NO、ET、PAF、TXB2、TNF、IL、缓激肽） ，使血管收缩、痉挛、通透性增加，加重了微循环障碍； 二、实验材料和方法 实验材料 TNF-α ELISA试剂盒、BK ELISA试剂盒均购自美国RD公司。 牛黄胆酸钠购自美国Sigma公司。 低分子量肝素（LMWH）购自广东天普生化医药股份有限公司。 重症急性胰腺炎大鼠模型的制作 Wistar大鼠32只作为实验对象，采用胆胰管内逆行注射5%牛磺胆酸钠溶液的方法复制SAP模型。术前禁食12h，饮水不限。1%戊巴比妥钠腹腔麻醉（3ml/kg）,固定大鼠。经上腹正中切口进腹，提起十二指肠以无损伤血管夹夹闭肝门部胰胆管。TB针经十二指肠穿刺胰胆管，加压注射5%牛黄胆酸钠(1ml/kg)，持续1min，助手捏紧十二指肠两端，保持3min，观察到胰腺迅速充血、间质水肿并有散在出血点，术毕关腹。 实验动物及分组及处理 统计学方法 所有数据应用SPSS13.0统计软件处理。 计量资料用均数±标准差表示。 TNF-α、BK比较采用重复测量资料的方差分析。 病理评分比较用单因素方差分析的LSD-t检验。 以α=0.05为检验水准 。 三、实验结果 各组大鼠血清TNF-α、BK的浓度（ng/L）及病理评分 病理切片 统计图表 TNF-α均数图（单位ng/L） BK均数图（单位ng/L） 胰腺病理切片的病理评分 四、讨论 TNF-α是最重要的炎性介质之一，其参与IL-1、IL-6和IL-8等炎症因子的产生且诱导自身的基因表达，导致各种炎症因子的大量释放，引起“瀑布”效应；促使白细胞趋化、黏附，使血管内皮细胞通透性增加；刺激血管内皮细胞产生内皮素一氧化氮和氧自由基等介质,加剧微循环障碍，导致胰腺组织坏死 [5,6] 。 缓激肽（BK）可以通过与血管紧张素、氧自由基、内皮素和血小板活化因子的相互作用来发挥其血管效应[3] 。Bloechle［7］等的实验研究表明缓激肽可导致微循环瘀滞，广泛的白细胞粘附，提示BK加重了微循环障碍并加重胰腺组织损伤。但是Weidenbach [8]等实验发现缓激肽对AP胰腺微循环具有保护作用。 LMWH在改善SAP微循环障碍方面已经得到基本肯定，大量实验证明LMWH对AP有治疗作用，可以降低AP炎症因子及血管活性物质的大量释放。潘小季[9]等的实验研究证明LMWH可以降低SAP大鼠炎症因子TNF-α、IL -6的释放，降低胰腺组织的TXB 2 / 6 -keto -PGF1α比值，改善SAP的微循环障碍。李介秋［10］等经实验研究表明LMWH能降低兔子急性坏死性胰腺炎(AHNP)模型的TNF，NO，淀粉酶（AMS），TXB2水平,抑制丙二醛（MDA）产生,可改善AHNP兔微循环障碍,对AHNP有一定治疗作用。 五、结论 本实验的研究表明，SAP组大鼠TNF-α和BK的血清含量随时间增加明显升高，并明显高于S组大鼠且胰腺病损程度明显升高，经过LMWH干预后，TNF-α和BK的释放随时间增加明显减少，同时经过LMWH干预的大鼠各时间点TNF-α和BK的释放明显低于SAP组且胰腺病损程度明显降低。表明TNF-α和BK的大量释放加重了SAP胰腺微循环障碍，同时LMWH可以减少TNF-α和BK的释放，从而改善SAP胰腺微循环障碍，减轻SAP胰腺病损程度，对SAP起到治疗作用。 六、参考文献 [1]. Bhatia M ，Neoptolemos JP，Slacin J. Inflammatory Mdiators as therapeutic targets in acute pancreatitis[J]. Curr Opin inves