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C值:一种生物单倍体基因组DNA的总量。
C值矛盾:真核生物中DNA的含量与已知功能基因所占的比例不协调的现象。
核小体(由H2A、H2B、H3、H4各两个分子组成的八聚体和大约200bpDNA组成的)核小体的装配:两分子的H3和两分子的H4先形成四聚体,然后由H2A和H2B形成的异二聚体在该四 聚体的两侧分别结合而形成八聚体。长146bp的DNA按左手螺旋盘绕在八聚体上1.8周,形 成核小体的核心颗粒。核心颗粒两端的DNA各有11bp与H1结合,形成完整的核小体。
SD(Shine-Dalgarno)序列:原核生物mRNA 5′端起始密码子上游8~12个核苷酸处富含嘌呤的保守区域(5′-AGGAGGU-3′),可与核糖体30S小亚基上16S rRNA 3′端的富嘧啶区互补配对,促使核糖体结合到mRNA上,有利于翻译的起始。该mRNA上的序列称SD序列。
核定位序列(NLS):内部序列-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys或任何五个连续的带正电荷氨基酸残基,能导致含该序列的蛋白被运进核内,这样的序列称为NLS。(NLS可以位于核蛋白的任何部位)
-10区:Pribnow box,由5个核苷酸共同组成,是RNA聚合酶的紧密结合位点。该序列中心位于转录起始点上游10bp处。(TATAA)
Hogness区:真核生物基因中位于-25~ -30bp处的共同序列TATA AA,也称TATA区。(作用:使转录精确起始)
应答元件:能与某个(类)专一蛋白因子结合,从而控制基因特异表达的DNA上游序列。
顺式作用元件(cis-acting element): 不转变为其他形式(RNA或蛋白质)而只以DNA形式在原来位置起作用的DNA序列。起作用的过程称顺式作用。
诱导(induction):通过小分子诱导物参与, 使阻抑物失活或活化激活剂来实现对基因或操纵子表达的调控 。
阻遏(repression): 通过小分子辅阻遏物参与,使激活剂失活或活化阻抑物来实现基因或操
信号肽(signal peptide):绝大多数越膜蛋白的N端都具有长度大约在13-36个残基之间的以疏水氨基酸为主的N端信号序列或称信号肽。
A激酶:能把ATP分子上末端磷酸基团加到某个特定蛋白质的丝氨酸或苏氨酸残基上的依赖于cAMP的蛋白激酶。
C激酶:依赖于Ca2+的蛋白激酶,具有一个催化结构域和调节结构域,主要是实施对丝氨酸、苏氨酸的磷酸化。
RFLP:是指基因型之间限制性片段长度的差异,这种差异是由限制性酶切位点上碱基的插入、缺失、重排或点突变所引起的。RFLP技术包括以下基本步骤:DNA提取→用限制性内切酶切DNA→用凝胶电泳分开DNA片段→把DNA片段转移到滤膜上→利用放射线标记的探针杂交显示特定的DNA片段和结果分析。
RAPD:是建立在PCR基础之上的一种可对整个未知序列的基因组进行多态性分析的分子技术。其以基因组DNA为模板, 以单个人工合成的随机多态核苷酸序列(通常为10个碱基对)为引物,在热稳定的DNA 聚合酶(Taq酶)作用下,进行PCR扩增。扩增产物经琼脂糖或聚丙烯酰胺电泳分离、溴化乙锭染色后,在紫外透视仪上检测多态性。扩增产物的多态性反映了基因组的多态性。
基因组文库:是将某种生物细胞内整个基因组DNA切成适当长度的片段,连接在载体上,转化到宿主细胞中而构建的克隆载体。
cDNA文库:是指将一种生物mRNA经反转录产生双链cDNA,以cDNA构建的克隆群体。
1、基因的分类?
从功能上:结构基因(编码酶,结构蛋白,tRNA,rRNA等非调节物)和调节基因(产物(RNA,蛋白质)具有调节其他基因表达功能的一类基因 )
从细胞分化:奢侈基因(与分化细胞的特殊形状有直接关系的基因群) 和管家基因(是维持细胞最低限度的功能所不可少的基因)
从结构上:重复基因(在染色体基因组中多次重复) 和非重复基因(一个染色体组中只存在一个或少数几个的基因)
2、DNA复制的几种形式?
(1)线性DNA双链的复制(先在ori处形成复制眼,从复制眼开始可以单向或双向复制,真核生物都是多复制眼起始的双向复制)
(2)θ型复制(环形DNA大多采用θ型复制,如E.coli。特点:从原点ori开始,通常采用双向等速复制,不断扩大复制泡,形成θ环)
(3)滚环型复制(rolling circle):某些环形的病毒DNA,如φx174、λ噬菌体都是以这种方式复制。这是一种单向复制类型
(4)D环复制 (D-loop):这种复制在环状DNA的特定位点开始。线粒体、叶绿体的DNA复制能以D-环模型进行。
3、DnaA蛋白和DnaB蛋白的功能?
大约20个DnaA蛋白在ATP的作用下与oriC处的4个9 bp保守序列相结合。在Hu蛋白和ATP的共同作用下,DnaA复制起始复
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