大肠杆菌的分离以及药敏试验.doc

大肠杆菌的分离以及药敏试验（悠然） ? 要：山东某集团送检的疑似大肠杆菌病的病死鸡的心、肝、脾，进行病原菌的分离、鉴定和药敏试验。结果显示引起该鸡场鸡只发病的病原为大肠杆菌，对阿米卡星、新霉素敏感，对头孢和新霉素的复方制剂中度敏感，几乎对可克林霉素不敏感。表明该鸡场出现了耐药的致病性大肠杆菌，在以后的肉鸡生产中应慎用抗生素，在使用药物治疗大肠杆菌病时，应根据药敏试验结果，选择敏感药物，且应注意交替用药，按疗程投药。关键词：大肠杆菌；分离鉴定；致病性；药敏试验大肠杆菌病是由大肠杆菌某些血清型菌株引起的一类疾病的总称。各个品种和日龄的鸡均可发病，但肉仔鸡最易感。随着养禽业的迅速发展与高度集约化饲养，鸡大肠杆菌病已成为鸡群重要的疾病之一。为了控制鸡大肠杆菌在鸡群中的传播，我们对送检的疑似大肠杆菌病例进行病原的分离鉴定，并对分离菌的培养特性、致病力及抗菌药物的敏感性进行了研究，为有效防制鸡大肠杆菌病提供了依据。1? 材料与方法1.1 病料来源2006年11月山东省某集团养殖场场送检的疑似大肠杆菌病的病料若干，已死亡鸡只死亡时间不超过24 h。1.2 细菌分离培养无菌采集病、死鸡的肝脏、心血等组织，接种在普通琼脂平板及普通肉汤，37℃培养20 h，抹片，革兰氏染色后镜检。挑取表面光滑，边缘整齐，灰白色半透明的单个小菌落划线接种于EC肉汤中，于37 ℃培养20 h。1.3药敏试验――打孔法常规制备琼脂板。用已灭菌处理的微型加样器吸取已培养好的生长16小时菌液0.5ml，加入普通琼脂板上，摇匀。无菌打孔，将每孔加入以稀释好的药液0.1ml。置于37 ℃培养24 h，观察结果。2 结果2.1细菌分离在营养琼脂平板上37 ℃培养20 h后，形成中等大小，圆形微凸起，表面光滑湿润，浅灰色半透明菌落。以及针尖大露珠样菌液。经分析部分为沙门氏菌和金黄色葡萄球菌。2.2肉汤中生长情况 分离菌在肉汤中培养18 h～24 h，呈均匀混浊，管底有黏性沉淀，液面管壁有菌环。部分菌株产气。2.3药敏试验结果见表1。由表1可见，此次分离的大肠杆菌对阿米卡星、新霉素敏感，对头孢和新霉素的复方制剂中度敏感，几乎对可克林霉素不敏感。其他药物的抑菌效果有待进一步证实，分离菌对其不敏感的一个可能原因是药物已接近其使用期限。 表1 分离菌株对6种药物的敏感性Table 1 Sensitivity of the isolated bacterium to 6? therapeutans 药物? ? ? ? ? ? 药物含量? ? 抑菌圈直径? ? ? ? ? ? ? 敏感菌数/（μg/孔）? ? ? /mm Diameters? ? ? ? ? ? 耐药/R? 低敏? 中度敏感/I? 敏感/S 阿米卡星? ? ? ? 2.5? ? ? ? ? ? ? 22? ? ? ? 6? ? ? ? 1? ? ? ? ? 6? ? ? 2新霉素? ? ? ? ? 2.5? ? ? ? ? ? ? 23? ? ? ? 6? ? ? ? 0? ? ? ? ? 7? ? ? 2克林霉素? ? ? ? 2.5? ? ? ? ? ? ? 0? ? ? ? ? 14? ? ? 0? ? ? ? ? 0? ? ? 1? ? ? ? ? ? 头孢曲松钠? ? ? 2.5? ? ? ? ? ? 11? ? ? ? ? 13? ? ? 0? ? ? ? ? 0? ? ? 2头孢新霉素? ? ? 2.5? ? ? ? ? ? 30? ? ? ? ? 7? ? ? 1? ? ? ? ? 7? ? ? 0头孢噻肟钠? ? ? 2.5? ? ? ? ? ? 0? ? ? ? ? 13? ? ? 0? ? ? ? ? 0? ? ? 2 表二，各场细菌药敏试验统计本次试验共来自九联不同养殖场以及以前保留菌株。各养殖场药敏监测结果如下： 来源? ? 头孢噻肟? 丁卡? 新霉素 头孢曲松? 克林? 新霉素加头孢噻肟? ? ? ? ? ? 7号? ? ? ? 耐药? ? ? 耐药? 耐药? ? 耐药? ? 耐药? ? ? ? 耐药? ? ? 17场? ? ? ? 耐药? ? ? 高敏? 高敏? ? 耐药? ? 耐药? ? ? ? 中敏? 12场3栋? ? 耐药? ? ? 高敏? 高敏? ? 耐药? ? 耐药? ? ? ? 低敏? ? ? ? ? ? ? 18场2栋? ? 高敏? ? ? 中敏? 中敏? ? 高敏? ? 耐药? ? ? ? 中敏? 18场2栋? ? 高敏? ? ? 中敏? 中敏? ? 高敏? ? 耐药? ? ? ? 中敏? 4号? ? ? ? 耐药? ? ? 耐药? 耐药? ? 耐药? ? 耐药? ? ? ? 耐药? 25场2栋? ? 耐药? ?