实验五液相色谱分析演示.doc

实验五 高效液相色谱分析演示实验 一 实验目的 熟悉高效液相色谱仪的仪器系统组成、工作原理以及工作流程。 通过实验演示过程，熟悉掌握高效液相色谱仪的基本操作方法。 了解高效液相色谱仪在材料科学中的用途 二 实验原理 高效液相色谱是目前应用最多的色谱分析方法，其仪器系统构成主要由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别, 被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。其工作流程如图1所示。 由于高效液相色谱仪具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用以及流出组分易收集等优点，因而已被广泛应用到材料科学、环境分析、无机分析、食品分析、医药研究等多种领域。 三、仪器与试剂 1．仪器：1）P230液相色谱仪(大连依利特公司) ；2）微量注射器、容量瓶 2．试剂：甲醇（色谱纯）、二次蒸馏水、苯 四、实验步骤 1．配制标准溶液：以二次蒸馏水为溶剂，于容量瓶中配制一定浓度的苯标准溶液。 2．依次开启电脑、动力泵、检测器以及色谱数据工作站，预热20分钟。 3．打开EC2000 色谱数据处理系统，进行色谱实验参数的设置，进入样品采集状态。 4．用25ul微量注射器准确抽取25.0 μL苯标准溶液，注射入进样口。转动平面六通阀，从load状态转入injection状态。 5．通过色谱数据处理软件注意观察苯色谱峰的产生。 五、思考题 1．高效液相色谱仪主要由哪些部件组成，各部件的主要作用是什么？ 图1　液相色谱仪工作原理图