第五章各类中药分析.ppt

色谱鉴别 具有较强的亲脂性，采用吸附色谱法可达到较好的效果，常用硅胶薄层色谱。 展开剂一般为亲脂性的溶剂 《中国药典》大多以香草醛试剂和10%的浓硫酸试剂显色 §6 木脂素类成分分析 6.4 含量测定 总木脂素成分含量测定 可采用变色酸比色法，二级导数光谱法，柱色谱-比色法。 变色法是根据木脂素类成分结构中亚甲二氧基与变色酸/浓硫酸试剂反应产生颜色。 §6 木脂素类成分分析 6.4 含量测定 单体木脂素的含量测定 含量测定的主要方法为色谱法，常用的有薄层色谱法和高效液相色谱法。 薄层色谱法，一般为吸附色谱法，以硅胶为吸附剂，低极性的有机溶剂展开。 HPLC一般以十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂，已腈-水或甲醇-水为流动相，紫外检测器。 §6 木脂素类成分分析 §4 其他类型成分分析 1.有机酸类分析 2.环烯醚萜类成分分析 3.香豆素类成分分析 4.单萜和二萜类成分分析 5.多糖类成分分析 §4 其他类型成分分析 有机酸 概述 理化性质 物理性状（存在的形态，溶解性） 提取分离 有机溶剂提取法 离子交换法 水蒸气蒸馏法 §4 其他类型成分分析 有机酸 定性鉴别 吸附色谱 分配色谱 含量测定 酸碱滴定法→总有机酸 分光光度法 高效液相色谱法 薄层色谱法 其他方法 §4 其他类型成分分析 环烯醚萜类 概述—特殊的单萜 理化性质 物理性状（存在的形态，多苦味，稳定性） 溶解性 易溶于水、甲醇，可溶于乙醇、丙酮、正丁醇 薄层定性鉴别 吸附剂 硅胶、聚酰胺 显色剂 硫酸乙醇，茴香醛试液，香草醛硫酸试液，对二甲氨基苯甲醛硫酸试液 龙胆苦甙 §4 其他类型成分分析 香豆素类 概述 理化性质 物理性状（存在的形态，气味，挥发性） 溶解性 紫外光谱特征 300nm（ε~10000） 分子荧光 补骨脂素 游离—易溶于甲醇、乙醇、乙醚、氯仿等 香豆素甙—能溶于水、甲醇、乙醇等 补骨脂素 §4 其他类型成分分析 香豆素类 定性鉴别 化学反应法 荧光法 薄层色谱法 七宝美髯颗粒中补骨脂素、异补骨脂素的鉴别 取本品10g，研细，加醋酸乙酯20ml、盐酸0.5ml，超声处 理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯0.5ml使溶解， 作为供试品溶液。 薄层条件：硅胶G薄层板，展开剂正已烷—醋酸乙酯（4:1）， 显色剂为10%氢氧化钾甲醇溶液，紫外光灯365nm下检视。 §4 其他类型成分分析 香豆素类 含量测定 分光光度法 荧光光度法 薄层色谱法 高效液相色谱法 气相色谱法 §4 其他类型成分分析 单萜及二萜类 含芍药甙中药制剂的分析 薄层色谱 高效液相色谱 含穿心莲内酯中药制剂的分析 薄层色谱 回滴法 比色法—总内酯 薄层扫描或高效液相色谱法—单体成分 §4 其他类型成分分析 多糖（polysaccharides） 概述 理化性质 物理性状（存在形式，还原性） 溶解性 溶于水，低浓度的酸碱，盐溶液，不溶于醇、醚、丙酮 提取分离 水提醇沉 ※防止水解，注意消除酶、酸、碱等的影响 §4 其他类型成分分析 多糖（polysaccharides） 定性鉴别 薄层色谱（硅胶、纤维素、硅藻土） 纸色谱 展开剂：正丁醇、水混合体系 显色剂：苯胺-邻苯二甲酸的正丁醇饱和水溶液等 电泳法 滤纸电泳、玻璃纤维纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳、凝胶电泳 高效液相色谱法 气质联用 酸水解→中和→柱前衍生→GC-MS §4 其他类型成分分析 多糖（polysaccharides） 含量测定 总多糖的测定 3,5-二硝基水杨酸比色法→棕红色（550nm） 苯酚-硫酸法→蓝绿色（480-490nm） 单体多糖的含量测定 高效凝胶液相色谱法→确定分子量 高效液相色谱法→确定组成 色谱柱：氨基键合相硅胶柱，或普通硅胶柱 检测器：示差折光检测器 §2 黄酮类成分分析 2.4 含量测定 2.4.2 单体黄酮成分的含量测定 薄层色谱法 薄层色谱法是测定中药制剂中单体黄酮类成分的关键是分离。样品经有机溶剂或水提取后，可用硅胶、纤维素或聚酰胺进行层析，以达到分离的目的。层析后可TLC-比色法测定；也可以用薄层扫描仪直接测定。 §2 黄酮类成分分析 2.4 含量测定 2.4.2 单体黄酮成分的含量测定 高效液相色谱法 黄酮类成分的HPLC： a.无羟基的黄酮类化合物或乙酰化黄酮类化合物，固定相为硅胶，流动相可套用薄层色谱条件，但极性要相对小一点。 b.乙酰化黄酮、有一个羟基的黄酮类成分，采用-CN键合相色谱，流动相为乙烷-氯仿。 §2 黄酮类成分分析 2.4 含量测定 2.4.2 单体黄酮成分的含量测定 高效液相色谱法 黄酮类成分的HPLC： c.含有2个以上羟基的黄酮类成分可选用-N