五章 酶.pptVIP

（5）km还可以推断某一代谢物在体内可能的代谢途径。 丙酮酸 乳酸 乙酰CoA 乙醛 乳酸脱氢酶（1.7×10-5） 丙酮酸脱氢酶（1.3×10-3） 丙酮酸脱羧酶（1.0×10-3） 当丙酮酸浓度较低时，代谢走哪条途径决定于km最小的酶。 米氏常数可根据实验数据作图法直接求得：先测定不同底物浓度的反应初速度，从v与[S]的关系曲线求得V，然后再从1/2V求得相应的[S]即为km（近似值）。 通常用Lineweaver-Burk作图法（双倒数作图法） —— 1 v = —— km V · —— [S] 1 + —— V 1 （y = ax + b） 斜率= km/Vmax 1/ [S] 1/v 1/Vmax -1/km （四）pH对酶作用的影响 pH v 最适pH（optimum pH） 1.最适pH 2.pH稳定性 表现出酶最大活力的pH值 在一定的pH范围内酶是稳定的 pH对酶作用的影响机制：1.环境过酸、过碱使酶变性失活；2.影响酶活性基团的解离；3.影响底物的解离。 （五）温度对酶作用的影响 两种不同影响：1.温度升高，反应速度加快；2.温度升高，热变性速度加快。 T v 最适温度 （六）激活剂对酶作用的影响 ——凡能提高酶活力的物质都是酶的激活剂。如Cl-是唾液淀粉酶的激活剂。 （七）抑制剂对酶作用的影响 ——使酶的必需基团或活性部位中的基团的化学性质改变而降低酶活力甚至使酶失活的物质，称为抑制剂（I）。 1. 不可逆抑制作用：抑制剂与酶的结合（共价键）是不可逆的。 S + E ES E + P + I ↓ EI E—SH +ICH2COOH →E—S—CH2COOH + HI （2）可逆抑制作用：抑制剂与酶的结合是可逆的。 抑制程度是由酶与抑制剂之间的亲和力大小、抑制剂的浓度以及底物的浓度决定。 [E] v 1 2 3 1. 反应体系中不加I。 2.反应体系中加入一定量的不可逆抑制剂。 3.反应体系中加入一定量的可逆抑制剂。 [E] v 不可逆抑制剂的作用 [E] v 可逆抑制剂的作用 [I ]→ [I ] ①竞争性抑制作用：抑制剂和底物竞争与酶结合。 特点：1）抑制剂和底物竞争酶的结合部位 S + E ES E + P + I ↑↓ EI v = ——————— V[S] km(1+[I ]/ki)+[S] ki = [E][I]/[EI] [S] v V/2 km 2）抑制程度取决于I和S的浓度以及与酶结合的亲和力大小。 km ′ 无 I 有 I 3）竞争性抑制剂的结构与底物结构十分相似。 ②非竞争性抑制作用：底物和抑制剂同时与酶结合，但形成的EIS不能进一步转变为产物。 S + E ES E + P + I ↑↓ EI + I ↑ EIS +[S] E+P v = ——————— ———— V 1+[I]/ki · [S] km + [S] [S] v 无 I V/2 km 有 I (′) * 第二章 酶 酶的概念 酶的分类与命名 酶的化学本质 酶的结构与功能的关系 酶作用的专一性 酶作用的机理 酶促反应的速度和影响酶促反应速度的因素 酶的制备与酶活力的测定 酶的应用 提要 一、酶的概念 酶是生物细胞产生的、具有催化能力的生物催化剂。 定义：酶是生物体内进行新陈代谢不可缺少的受多种因素调节控制的具有催化能力的生物催化剂。 酶具有一般催化剂的特征：1.只能进行热力学上允许进行的反应；2.可以缩短化学反应到达平衡的时间，而不改变反应的平衡点；3.通过降低活化能加快化学反应速度。 酶的催化特点： 1.高效性：通常要高出非生物催化剂催化活性的106~1013倍。 2H2O2 2H2O + O2 1mol过氧化氢酶 5×106molH2O2 1mol离子铁 6×10-4molH2O2 2.专一性：酶对底物具有严格的选择性。 3.敏感性：对环境条件极为敏感。 4.可调性：酶活性的调节和酶合成速度的调节。 二、酶的分类与命名 1961年国际酶学委员会（Enzyme Committee, EC）根据酶所催化的反应类型和机理，把酶分成6大类： 1. 氧化还原酶类：主要是催化氢的转移或电子传递的氧化还原反应。 AH2 + B（O2） A + BH2（H2O2，H2O） （1）脱氢酶类：催化直接从底物上脱氢的反应。 AH2 +B A +BH2（需辅酶Ⅰ或辅酶Ⅱ） （2）氧化酶类 ①催化底物脱氢，氧化生成H2O2： AH2 + O2 A + H2O2（需FAD或FMN） ②催化底物脱氢，氧化生成H2O： 2AH2 + O2 2A + 2H2O （3）过氧化物酶 ROO + H2O2 RO + H2O + O2 （4）加氧酶（双加氧酶和单加氧酶） O2 +