细胞培养液中多溴联苯醚以及代谢产物的GC-MS_MS测定方法.pdf

第 39卷 分析化学 (FENXIHUAXUE) 研究报告 第 3期 2011年 3月 ChineseJournalofAnalyticalChemistry 361～ 366 DO1：10．3724／SP．J．1096．2011．00361 细胞培养液 中多溴联苯醚以及 代谢产物的 GC—MS／MS测定方法 苏冠勇 温 泉 韦 斯 冯建防 刘红玲 于红霞 (南京大学环境 学院 ，污染控制与资源化研究 国家重点实验室 ，南京 210093) 摘 要 利用柱前衍生化耦合气相顾 谱顾 谱 (GC／MS／MS)，建立 了细胞培养液中 13种多溴联苯醚 (PBDEs)、 8种 甲氧基化多溴联苯醚 (MeO-PBDEs)和 5种羟基化 多溴联苯醚 (HO~PBDEs)的分析方法 。采用氯甲酸 甲酯 作为 HO-PBDEs的衍生化试剂 ，相 比传统重氮 甲烷作为衍生化试剂 的方法 ，其衍生化时间明显缩短。同时 ，衍 生物与 PBDEs不必分离即可进行衍生化 ，缩短 了前处理时间。在恒温 (20．0℃)、控速 (250rm／in)及 乙腈 甲醇一 水一吡啶(5：2：2：1， )等条件下 ，26种化合物的回收率在 86．1％～ 112．3％之间，相对标准偏差低于 16．9％， 方法检出限在 O．0o7～0．440 g／L之间，仪器检 出限在 0．134～8．798 g／L之 间；在细胞培养液 6个加标浓度下 ， 其相关系数平方均大于 0．9955。体外细胞实验发现 ，经大 鼠原代肝细胞暴露后 的 2，2，4,4-四溴联苯醚 (BDE-47)和 2,2，4，4,5-／i~溴联苯醚 (BDE99)，无 明显脱溴现象 ，未检出 甲氧基化代谢物 ，但有羟基化代谢产物 生成 ，此结果通过保留时间 、选择反应离子模式 (SelectedReactionMode，SRM)和全 扫模式 (FullscanMode)3种 信息 同时鉴定 。 关键词 多溴联苯醚 ；液液萃取 ；柱前衍生化 ；大 鼠原代肝细胞 1 引 言 多溴联苯醚 (PBDEs)具有 良好 的阻燃性能 ，在 电子、纺织等工业生产中大量应用I卜1，使得这些化合 物进入环境并在食物链 中放大蓄积 。因此 ，近年来关于PBDEs的报告越来越多 ～ 。 羟基化多溴联苯 醚 (HO-PBDEs)与 甲氧基化多溴联苯醚 (MeO-PBDEs)及 PBDEs相 比，其毒性更 大 8【 ，三者之间的代谢转化关系在不同物种之间有较大差异 。Kierkega等分析梭子鱼体 内PBDEs 和MeO—PBDEs的含量 ，发现两种化合物 间并无直接 的转化关系 ；Kelly等通过调查北极海域食物链 系统中3类化合物的浓度 ，指 出MeO-PBDEs和 OH—PBDEs是 由PBDEs代谢而来 1；文献 [16]指 出，从 PBDEs转化来的HO-PBDEs很少 ，HO-PBDEs与 MeO-PBDEs却有 明显的转化关系，该结论又被作者通 过体外微粒体代谢实验进一步验证 6]。 由于PBDEs的研究工作开展较早 ，针对该类化合物有效的分析方法 已经建立 ，Me()IPBDEs可 以与 PBDEs同时处理分析 ；HO-PBDEs由于其 自身化学结构 (羟基官能团)的限制 ，在气相分析前须进行衍生 化 。目前 ，常见的HO-PBDEs的分析检测方法有液相色谱一质谱 (LC／MS)直接进样法和柱前衍生化耦合 气相色谱一质谱 (Gc／Ms)进样分析法 l【圳 。考虑仪器的分离效果和灵敏度，后者更为常用 。重氮 甲烷常 被用作柱前衍生化试剂 l【 ，但该衍生化方法所需时间长，毒性大且易爆 。 本研究建立一种能同时分析细胞培养液中PBDEs、MeO-PBDEs和HO-PBDEs的快速安全的方法。 通过体外大 鼠原代肝细胞实验 ，对本方法的可行性进行了验证 。 2 实验部分 2．1 仪器与试剂 TSQQuantum GC气相色谱质谱联用仪 (美 国ThermoScientific公司)，配备 DB-XLB毛细管柱 (15mx0．25mm×0．25 m，美 国