第二章 蛋白质和非蛋白含氮化合物检验.ppt

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二、体液白蛋白 【检测方法】 染料结合法 原理:阴离子染料溴甲酚绿(bromcresol green ,BCG) 溴甲酚紫(bromcresol purple ,BCP)能与ALB结合, 其最大吸收峰发生转移。 BCG与ALB形成的蓝绿色复合物在630nm处有吸收峰, BCP与ALB形成的绿色复合物在603nm处有吸收峰。 而球蛋白基本不结合这些染料。 二、体液白蛋白 【参考区间】 随年龄有所变化,0~4天:28~44 g/L 4天~14岁:38~54 g/L,此后下降 成人:35~52 g/L,>60岁为32~46 g/L 走动者比卧床者平均高3 g/L 【医学决定水平】:>35g/L时正常 28~34g/L为轻度缺乏 21~27g/L为中度缺乏 <21g/L则严重缺乏 低于28g/L时,会出现组织水肿 【临床意义】 ALB增高仅见于严重失水时,无重要临床意义 低ALB血症见于下述许多疾病情况: (1)白蛋白合成不足: ①严重肝脏合成功能下降如肝硬化、重症肝炎 ②蛋白质营养不良或吸收不良 ALB受饮食蛋白质摄入量影响,可作为营养状态的评价指标,早期缺乏时不易检出。    二、体液白蛋白 【临床意义】 (2)白蛋白丢失: ①尿中丢失如肾病综合征、慢性肾小球肾炎、 糖尿病肾病、系统性红斑狼疮性肾病等 ②胃肠道蛋白质丢失,因黏膜炎症坏死 ③皮肤丢失如烧伤及渗出性皮炎等 (3)白蛋白分解代谢增加: ①组织损伤如外科手术和创伤 ②组织分解增加如感染性炎症疾病等 二、体液白蛋白 【临床意义】 (4)白蛋白的分布异常: 门静脉高压时大量ALB从血管内漏入腹腔 (5)无白蛋白血症: 极少见的遗传性缺陷,血浆ALB含量常低于1g/L 二、体液白蛋白 【方法评价】 (1)两种染料结合法均操作简便、重复性好 (2)特异性 BCG与ALB为快反应,30秒基本完全 血清α和β球蛋白能起慢反应,程度较ALB低 缩短反应时间能避免非特异性反应 BCP与ALB即时完全反应 无球蛋白非特异性干扰 但BCP与牛、猪等ALB的反应性比人ALB程度低 二、体液白蛋白 【方法评价】 (3)临床应用:两法均适合于血清白蛋白测定 BCP法检测范围为5~50g/L,上限较低 BCG法检测范围为5~60g/L,应用更方便 BCG法测定胸腹腔积液ALB检测低限为0.44g/L 生物检测限0.98g/L,胸腹腔积液1.5~35 g/L 能采用BCG法测定 尿液和脑脊液ALB定量则不适宜采用该法 二、体液白蛋白 三、血清蛋白电泳 (serum protein electrophoresis,SPE) 【检测原理】 pH 8.6缓冲液中血清中各种蛋白质都电离成负离子,在电场中向正极移动;因各种蛋白质pI不同,在相同pH下带电荷量有差异,各蛋白质分子大小与分子形状也不相同,故在同一电场中泳动速度不同。 血清蛋白质被分成5个主要区带 从正极起依次为ALB、α1、α2、β、γ球蛋白 三、血清蛋白电泳 【参考区间】 白蛋白57%~68% α1球蛋白1.0%~5.7% α2球蛋白4.9%~11.2% β球蛋白7%~13% γ球蛋白9.8%~18.2% 不同染色剂和电泳条件参考区间不同 各实验室应建立自己的参考区间 正常人SPE图谱 三、血清蛋白电泳 图谱类型 TP Alb α1 α2 β γ 低蛋白血症型 ↓↓ ↓↓ N↑ N ↓ N↑ 肾病型 ↓↓ ↓↓ N↑ ↑↑ ↑ ↓N↑ 肝硬化型 N↓↑ ↓↓ N↓ N↓ β-γ↑(融合) 弥漫性肝损害型 N↓ ↓↓ ↑↓ ↑ M蛋白血症型 在 α-γ 区 带 中 出 现 M 蛋 白 区带 慢性炎症型 ↓ ↑ ↑ ↑ 急性时相反应型 N ↓N ↑ ↑ N 高α2(β)-球蛋白血症型 ↓ ↑↑ ↑ 妊娠型 ↓N ↓ ↑ ↑ N 蛋白质缺陷型 个 别 区 带 出 现 特 征 性 缺 乏 【临床意义】 1.血清蛋白电泳异常图谱 三、血清蛋白电泳 【临床意义】 2.血清蛋白电泳典型图谱 (1)肾病型:ALB下降,α2显著升高 β明显升高,γ不变或相对下降 (2)肝硬化型:ALB下降,γ明显升高 典型者β和γ区带融合,见β-γ桥 肾病型 肝硬化型 三、血清蛋白电泳 【临床意义】 3.免疫球蛋白增多 (1)单克隆免疫球蛋白增多: γ或γ~β间色泽深染的窄区带,单克隆免疫球蛋白或其轻链或重链片段,称M蛋白(monoclonal protein),见于浆细胞病。 M蛋白电泳位置大致反应Ig类型,IgA位于β区后部或

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