PA对人胃癌细胞放射敏感性探析.doc

PA对人胃癌细胞放射敏感性的分析 　　[摘要]目的 观察紫杉醇（PA）对人胃癌细胞株SGC7901放射敏感性的影响。方法 采用MTT法获得PA对SGC7901细胞的半数抑制浓度（IC50），并以20%的IC50剂量为增敏浓度；克隆形成实验检测单纯照射组与PA（增敏浓度）+照射组在0、2、4、6、8 Gy X线照射后的细胞存活率，并观察细胞周期的改变及细胞形态的变化。结果 PA对SGC7901细胞的IC50为16.11 μg/ml，随着照射剂量的逐渐增加，单纯照射组和PA+照射组细胞存活率呈下降趋势，从4 Gy开始，PA+照射组细胞的存活率低于单纯照射组（P 　　1.3.3克隆形成实验 取SGC7901细胞，消化接种成单细胞悬液，接种合适数量的细胞于6孔板中。实验分为单纯照射组和PA+照射组，两组都给予0、2、4、6和8 Gy的X线照射，设置3个复孔。结晶紫染色，计算50个细胞的克隆数 1.3.4细胞周期检测 SGC7901细胞接种于6孔板中，浓度为1×106个/ml，培养24 h，分为空白对照组、单纯照射组、PA+照射组，以1000 r/min离心去除固定液，调整细胞加入碘化丙啶（PI）染液[9-10]，上机检测并分析细胞周期分布 1.3.5细胞光镜形态学观察 设空白对照组、单纯照射组、PA+照射组，配制0.15%的胰蛋白酶消化细胞，制成5×104个/ml单细胞悬液接种于24孔培养板中[11]，置于培养箱内培养48 h后，PBS洗涤，室温干燥后树胶封片，光镜下观察、拍照 1.4统计学处理 采用统计软件SPSS 15.0对实验数据进行分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用t检验，多组间比较采用方差分析。以P0.05）（表2） 2.4光镜观察下的细胞形态学结果 光镜下观察SGC7901细胞排列分散，为多角形，SGC7901细胞界限清楚，细胞核圆形，体积大。PA+照射组细胞界限不清，细胞变圆，核仁着色浅，胞质内可见大量颗粒（图1） 3讨论 恶性肿瘤对人类健康有严重威胁，放射治疗在肿瘤的治疗中具有重要作用。因为肿瘤本身存在的敏感性和乏氧程度等的不同，所以肿瘤对放射治疗敏感性有差异[12-13]。胃癌患者大多数对放射治疗的耐受性较差，因此使用良好的放射增敏剂是提高胃癌放疗效果的有效方法[14-15] PA抗癌机制主要是结合于细胞骨架的微管蛋白，促进微管蛋白的聚集，阻滞其解聚成亚单位，抑制有丝分裂的进行，进而诱导细胞凋亡[16-18]。实验证明PA具有放射增敏作用，可能是中止对放疗敏感的G2和M期[19] 本研究中克隆形成实验结果显示，随着X射线照射剂量的增加，胃癌细胞的集落形成下降，同等剂量下，PA+照射组与单纯照射组比较，集落形成数量下降。自4 Gy照射剂量开始，单纯照射组和PA+照射组细胞的存活率比较差异显著，提示PA具有放射增敏作用 放射生物学研究指出在细胞周期的不同时期放射的敏感性也不同，放疗最敏感为M期和G2期细胞，其次是G0/G1期，可通过使进入S期的细胞减少和造成G2/M期阻滞进而改变细胞周期，杀伤肿瘤细胞。在本研究中，PA+照射组G2/M期比例升高，S期比例下降，与单纯照射组比较，差异显著，提示PA对于胃癌细胞的增敏影响可能通过增加对放射线敏感的G2/M期分布比例来实现，与相关文献报道[20]相吻合 综上所述，PA对胃癌SGC7901细胞具有放射增敏作用，其机制可能是G2/M期阻滞。本研究为PA的综合治疗胃癌提供了一定的理论依据 [参考文献] [1]所剑，王大广，刘泽锋.早期胃癌诊断和治疗[J].中国实用外科杂志，2011，8（31）：717-718. [2]陈颜，官成浓.TLR4与肿瘤的研究进展[J].临床医学工程，2012，19（1）：138-140. [3]郑秀龙，金一尊，沈瑜.肿瘤治疗增敏药[M].上海：科学技术文献出版社，2002：163-164. [4] Chen P，Zhao SH，Chu YL，et al.Anticancer activity of PDSS2，prenyl diphosphate synthase，subunit 2，in gastric cancer tissue and the SGC7901 cell line[J].Anticancer Drugs，2009，20（2）：141-148. [5]Kurt M，Aksoy S，Cizginer S，et al.Gastric cancer and the coincidental finding of herpetic esophagitis immediately after pregnancy：a case report[J].