三种方法消除乳糜血干扰血细胞探析应用.doc

三种方法消除乳糜血干扰血细胞分析的应用 　　【摘要】 目的：研究消除乳糜血干扰库尔特LH750血液分析仪主要检测指标的方法。方法：选取每日仪器检测后已明确的乳糜血标本，并在2 h内随机选择稀释、空白、置换三种方法进行再检测分析，主要分析WBC、RBC、PLT、Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC、NEU%、LYM%、MON%、EOS%、BASO%共13个参数指标，累计检测标本共95份。所有实验标本剩余血液经生化仪检测甘油三酯含量，并以TG0.05）。轻中度乳糜组仅稀释法处理前后的Hb、MCH比较差异有统计学意义（P0.05）.The differences in Hb，MCH of chylous mild to moderate group before and after processing by dilution method were statistically significant（P 　　doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2016.24.024 库尔特LH750是贝克曼库尔特公司一款比较经典的五分类血液分析仪，仪器工作原理为细胞计数采用阻抗法、血红蛋白为比色法、白细胞分类为VCS（容量、电导、光散射）原理[1]。鉴于血细胞分析仪特殊结构和分析原理，有很多因素影响仪器分析结果的准确性，如乳糜脂血、冷凝集、溶血因素等[2-3]。其中乳糜脂血是最常见因素之一，在日常工作中，如何发现这些干扰因素及采取相应的纠正措施保证检测结果的正确性，是实验室必须重视的问题，现对消除乳糜因素干扰细胞分析指标的研究报道如下 1 材料与方法 1.1 标本来源 标本来源于2015年6-9月笔者所在医院门诊及住院患者，对照选择实验当天无溶血、无乳糜现象的新鲜标本 1.2 仪器与试剂 血细胞分析使用Backman Coulter LH750血细胞分析仪，甘油三酯（TG）测定使用Backman Coulter AU680生化分析仪，试剂及校准质控均使用厂家配套 1.3 方法 抽取患者静脉血2 ml置于EDTA-K2真空采血管，严格按操作规程检测，检测后标本室温静置30 min左右，选取血浆层明显脂浊的血标本。选取每日仪器检测后已明确的乳糜血标本，并在2 h内随机选择稀释、空白、置换三种处理方法之一进行再检测分析，累计检测标本共95份。实验选择的分析指标为白细胞计数（WBC）、红细胞计数（RBC）、血小板计数（PLT）、血红蛋白含量（Hb）、红细胞压积（HCT）、平均红细胞体积（MCV）、平均红细胞血红蛋白含量（MCH）、平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）、中性粒细胞百分比（NEU%）、淋巴细胞百分比（LYM%）、单核细胞百分比（MON%）、嗜酸性粒细胞百分比（EOS%）、嗜碱性粒细胞百分比（BASO%）。所有实验标本剩余血液经生化仪检测甘油三酯含量，并以TG0.05）。轻中度乳糜组仅稀释法处理前后的Hb、MCH比较差异有统计学意义（P0.05）；但重度乳糜组Hb、MCH、MCHC、PLT、EOS%三种方法处理前后比较，差异均有统计学意义（P0.05），表明三种实验方法学均可接受。在LH750血细胞分析仪上，Hb测定原理为比色法，遵守朗伯-比尔定律，仪器无法跟生化仪一样可以消去样本空白值来排除干扰，被检血中乳糜微粒虽经过试剂251倍的稀释及溶血剂的溶解作用来减少这种干扰，但高乳糜血对Hb的干扰还不足以完全消除，这种影响程度与乳糜严重程度正相关，实验结果也证实了这种干扰，三种方法重度乳糜组的Hb处理前后差异有统计学意义（P0.05）。国内也有报道指出TG含量在7.0 mmol/L时可对Hb等多项参数有影响，并且这种影响超出了仪器精密度范围要求[6]。血细胞计数的计数原理有电阻抗、鞘流电阻原理等[7]。库尔特LH750细胞计数采用电阻抗原理，拥有脉冲编辑和重叠校正专利技术的功能，可删除不规则脉冲和重叠颗粒的计数信号，能有效区分识别形态相对稳定的细胞群体，而乳糜微粒一般大小不等、颗粒不规则，所以乳糜血对细胞群形态稳定完整的WBC、RBC计数影响不大。而PLT由于体积大小不等的形态特性，大小与PLT相近的乳糜微粒可对其计数可造成一定干扰，由于LH750分析仪在PLT计数时血液要经6250倍稀释，因而PLT干扰仅在高乳糜状态下才显现出来，这也与实验RBC、WBC参数结果差异无统计学意义（P0.05）、重度组PLT结果差异有统计学意义（P 　　三种方法处理乳糜血的实验比较发现，轻中度乳糜组结果仅稀释法的Hb、MCH比较差异有统计学意义（P