中山地区非缺失型α―地中海贫血基因在高危人群中筛查结果探析.doc

中山地区非缺失型α―地中海贫血基因在高危人群中的筛查结果分析 　　【摘要】 目的 了解广东省中山地区育龄女性中常见非缺失型α-地中海贫血（α-地贫）的基因突变类型及构成比。方法 应用反向斑点杂交（RDB）技术和高效液相色谱法（HPLC）对40000例受检对象进行非缺失型α-地贫基因分析。结果 中山地区育龄妇女非缺失型α-地贫基因总携带率为0.41%（165/40000）， 其中异常血红蛋白QS（HbQS）111例， 发生率为0.28%， 构成比为67.27%；异常血红蛋白WS（HbWS）30例， 发生率为0.08%， 构成比为18.18%；异常血红蛋白CS（HbCS）24例， 发生率为0.06%， 构成比为14.55%。结论 该研究首次阐述了广东省中山地区育龄妇女中常见非缺失型α-地贫的分子流行病学情况， 为本地区开展地贫筛查工作， 降低非缺失型血红蛋白H（HbH）病患儿出生率， 制定干预方案提供了重要的科学依据 【关键词】 非缺失型α-地中海贫血；基因；筛查 DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.27.081 α-地贫是一组遗传性血红蛋白合成障碍性疾病， 其发病机制是由于α珠蛋白基因发生缺失或点突变， 使其编码的α珠蛋白链缺如或不足， 从而引起严重的溶血性贫血[1]。可分为缺失型（主要的变异类型）和非缺失型两种， α珠蛋白基因大片段的缺失可导致缺失型α-地贫的发生， 而非缺失型α-地贫则是由于α珠蛋白基因或其调节序列发生点突变（包括核苷酸的缺失或插入以及单碱基置换）所致。α-地贫具有高度的遗传异质性， 其分子缺陷具有一定程度的种族特异性。关于缺失型α-地贫的研究既往的分子流行病学调查资料较多， 而对非缺失型α-地贫则报道甚少。因血红蛋白（Hb） Barts水肿胎的致死性， HbH病是临床上出生后最严重的α-地贫类型， 也分为缺失型和非缺失型两种， 后者临床表现更为严重[2]。据报道， 在我国广西省有45.8%～53.3%的HbH病患者携带有非缺失型α-地贫基因[3]。因此在高危人群中筛查非缺失型α-地贫基因携带者尤为必要。本研究旨在初步了解中山地区非缺失型α-地贫的基因突变类型和构成比， 以进一步提高α-地贫的总检出率， 为本地区开展地贫筛查工作， 降低非缺失型HbH病患儿出生率， 制定干预方案提供重要的科学依据。报告如下 1 资料与方法 1. 1 一般资料 受检对象为2013年7月～2015年7月产前诊断门诊接受咨询的40000例已婚待孕或已孕妇女， 年龄20～40岁。所有受试者均知情同意 1. 2 方法 血常规初筛：使用EDTA抗凝管采集外周静脉血2～4 ml， 采用五分类全自动血常规分析仪进行血细胞分析， 应用血常规进行地贫初筛， 以平均红细胞体积（MCV）≤82 fl 和（或）平均红细胞血红蛋白量（MCH）≤27 pg 为筛查阳性， 筛查阳性者则进一步行HPLC检测。HPLC：筛查采用HPLC法测定HbA2和HbF的洗脱峰含量。基因型鉴定：对可疑非缺失型α-地贫基因携带者进行常见非缺失型α-地贫基因检测， 主要包括血常规初筛阳性而常见缺失型α-地贫基因未检出异常者；α-地贫缺失型检测为--SEA/αα， 但HPLC提示为HbH病者；血红蛋白电泳异常；配偶为--SEA/αα携带者。采用反向斑点杂交法对3种非缺失型α-地贫基因（HbCS、HbQS、HbWS）进行检测， 按DNA提取试剂盒（ 北京天根生化科技有限公司）说明提取基因组DNA， 采用基因诊断试剂盒（深圳益生堂生物技术有限公司）进行基因检测。诊断采用《血液病诊断与疗效标准》中的地贫诊断标准[4] 2 结果 40000例参加孕前孕期筛查的育龄妇女中有480例进行3种非缺失型α-地贫基因筛查， 共有165例检出常见非缺失α-地中海贫血基因携带， 总携带率为0.41%（165/40000）， 其中HbQS 111例（αQS α/αα 105例、-- SEA /αQSα 5例、-α3.7/αQSα 1例）， 发生率为0.28%， 构成比为67.27%；HbWS 30例（αWS α/αα 30例）， 发生率为0.08%， 构成比为18.18%；HbCS 24例 （αCS α/αα 22例、--SEA /αCSα2例）， 发生率为0.06%， 构成比为14.55% 3 讨论 地中海贫血是我国长江以南各省发病率最高的遗传疾病之一， 尤以广东、广西、贵州、四川等省发病为高[5]。可分为α-地贫、β-地贫、αβ-地贫以及δ-地贫等类型。α-地贫是最主要的地贫类型之一。一份基于全国90万人的流行病学调查结果得出的总发病率为2.46%， 其中以广西省最高， 发病率为14 .95%， 其次为广东和江西省，