增殖的影响作用.PDF

中华泌尿外科杂志 2006年 4 月第 27卷增刊 　Ch in J U rol, Ap ril 2006, Vol 27 , Supp l ·63 · ·论著 · siRNA 蛋白抑制对 LNCaP细胞 增殖的影响作用 季涌 　王晓峰 　陈国强 　金滨 　杨波 　何培英 　闫征 α ( ) ( ) 【摘要 】　目的　筛选针对 甲基 辅酶 A 消旋酶 AMACR 的小分子干扰 RNA siRNA ,探讨该 蛋白抑制后对前列腺癌细胞系 LNCaP增殖的影响 。　方法 　设计并合成 3对针对 AMACR 的 siRNA TM TM 序列 ,通过 siPOR T N eoFX 转染 LNCaP 细胞 ; R TPCR 检测 siRNA 作用后 AMACR mRNA 的表达 , W e stern b lot检测 AMACR 蛋白表达 , CCK8检测细胞增殖情况 ,流式细胞术检测细胞凋亡 。　结果 　 通过测定条带灰度值并分析 ,编号 2 1030 的 siRNA 可有效抑制 AMACR 表达约 77% ,有效抑制 AM ACR mRNA 水平约 60% ,编号为 113442和 2 1203 的 siRNA 均不能有效抑制 AMACR 表达 。转染编号 2 1030 的 siRNA 可抑制 LNCaP细胞增殖 ,但未发现明显的细胞凋亡 。　结论 　编号 2 1030 的 siRNA 可特异有效下调 LNCaP AMACR 基因表达 ,该蛋白抑制后可抑制 LNCaP细胞增殖 ,为前列腺癌基因 治疗提供新的思路 。 【关键词 】　前列腺肿瘤 ; 　癌 ; 　小分子干扰 RNA ; 　基因治疗 The screen ing of siRNA to AM ACR an d the influen ce of L NCaP　J I Yong , WAN G X iaof eng, CHEN Guoqiang, J IN B ing, YAN G B o, HE P eiy ing, YAN Z heng. D ep a rtm en t of U rology, P eop le ’s H osp ita l, P ek ing Un ivers ity, B eij ing 100044, Ch ina Corresp ond ing au thor: J I Yong, Em a il: beaver1999 @ sohu. com 【A b stract】　O bjective　To screen a siRNA to AMACR , and to inve stigate the p roliferation influence of p ro state cancer cell line LNCaP after the p rotein inh ib ition. 　M ethods　D esign and synthe sization of 3 TM TM AMACR siRNA sequences, and LNCaP cells were tran sfected by siPOR T N eoFX ; the exp re ssion of AM ACR mRNA after siRNA action wa s detected by R TPCR; the exp ression of AMACR p rotein wa s detected by W e stern b lot; the p ro