银新杨中与DRE元件结合的转录因子的克隆.doc

分类号： 单位代码：10749 密 级： 学 号：0203118 宁　夏　大　学 银新杨中与DRE元件结合的转录因子的克隆及其转化新疆杨的研究 Isolation of DRE-Binding Transcription Factor from Yinxin Poplar (P. alba×P. alba var. pyramidalis) and its Transformation to P. alba var. pyramidalis 研 究 生： 指 导 教 师： 宋 玉 霞 研究员 申 请 学 位 类 别： 理学硕士 专 业 领 域 名 称： 生物化学与分子生物学 研 究 方 向： 植物基因工程 所 在 学 院： 生命科学学院 二 零 零 六 年 三 月 独 创 性 声 明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得宁夏大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 研究生签名： 时间： 年 月 日 关于论文使用授权的说明 本人完全了解宁夏大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意宁夏大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。 （必威体育官网网址的学位论文在解密后应遵守此协议） 研究生签名： 时间： 年 月 日 导师签名： 时间： 年 月 日 摘 要 DREB（Dehydration-Responsive Element Binding）转录因子是一类植物特有的，在植物感受非生物逆境（干旱、高盐和低温）胁迫时，通过与DRE（Dehydration-Responsive Element）/CRT（C-repeat）元件相互作用诱导一系列干旱、高盐和低温胁迫应答基因表达的调控因子，在保护植物免受非生物逆境胁迫的伤害中起重要作用。本研究选用银新杨（P. alba×P. alba var. pyramidalis）为材料，通过PCR和同源EST有哪些信誉好的足球投注网站的方法克隆得到一个类DREB的基因，命名为PaDREB2。酵母单杂交实验表明，该基因编码的蛋白能特异地与DRE元件结合并激活下游报告基因的表达。用RT-PCR的方法研究了PaDREB2的表达模式，结果表明PaDREB2受低温、干旱和高盐的胁迫诱导。因此推测PaDREB2是DREB类转录因子大家组的一个成员。 新疆杨（P. alba var. pyramidalis）是银白杨的变种，具有较耐寒、耐盐碱、抗干旱、抗风和抗烟尘等特性，是西部地区造林绿化的理想树种。选用常规的组织培养技术获得新疆杨无菌苗，并建立了高效的再生体系和遗传转化体系。选用逆境诱导型启动子rd29A启动PaDREB2基因，构建到植物表达载体上，并用农杆菌介导的叶盘转化法转化新疆杨。通过抗生素筛选和PCR检测的方法得到了25个转基因阳性株系。 关键词：DREB转录因子，PaDREB2，新疆杨，银新杨 Abstract Dehydration-Responsive Element Binding (DREB) transcription factorsspecifically binding with dehydration reponsive element (DRE)，activate a variety of stress-responsive genes in plants under abiotic stresses (dehydration，high salt and low temperature)．So it plays an important role in protecting plants from abiotic stresses，such as dehydra