一种国产乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂不同检测平台上的验证情况分析.pdf

标记免疫分析与临床 2017年3月第 24卷第3期 341 一 种国产 乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂 不 同检测平台上的验证情况分析 李云霞 ，邬 兰 ，邱 樊 (1．永煤集团总医院检验科 河南 商丘476600；2．南京医科大学附属南京医院 南京市第一医院核医学科实验诊断部分子诊断室，江苏 南京210006) 摘要：目的 将圣湘公司乙型肝炎病毒 (HBV)核酸定量检测试剂盒 (PCR-荧光探针法)在不同荧光定量PCR系统进行性 能验证，以给出该试剂盒在不同检测平台上的性能评价。方法 依据美国临床和实验室标准化协会 (CLSI)颁布的EP系 列文件和 《医学实验室质量和能力认可准则》相关文件，应用 RocheLightCycler@ 480II实时荧光定量PCR系统及美国 ABI7500型实时荧光定量PCR系统对圣湘公司乙型肝炎病毒(HBV)核酸定量检测试剂盒(PCR一荧光探针法)进行临床 样本精密度、正确度、可报告范围和检测下限的性能验证实验。结果 LightCycler@ 480II实时荧光定量 PCR系统 ：2× 10IU／mL浓度水平批内精密度为 1．38％，批间精密度为0．25％；2×10IU／mL浓度水平批 内精密度为0．35％，批间精密 度为0．79％。正确度验证可溯源标准品，偏倚均小于7．5％，符合厂家说明及文件要求。HBVDNA定量结果在2．1x10 IU／mL至2．1×10Iu／mL浓度水平范围内线性关系良好 (R =0．9994)，临床可报告范围为2．1×10IU／mL～2．1×10IU／ mL。该系统检测下限为 148IU／mL。ABI7500型实时荧光定量PCR系统 ：2×10。Iu／mL浓度水平批内精密度为0．70％， 批间精密度为 1．34％。2．5×10IU／mL浓度水平批内精密度为 1．18％，批问精密度为3．01％ 。正确度验证可溯源标准 品，偏倚均小于7．5％，符合厂家说明及文件要求。HBVDNA定量结果在2×10。IU／mL至2×10。IU／mL浓度水平范围内 线性关系良好 (R =0．9991)，临床可报告范围为2×10IU／mL～2×10IU／mL。该系统检测下限为203IU／mL。结论 圣 湘公司乙型肝炎病毒 (HBV)核酸定量检测试剂盒(PCR．荧光探针法)在RocheLightCycler@ 480II实时荧光定量 PCR系 统及美国ABI7500型实时荧光定量PCR系统上的性能验证结果均符合试剂说明书性能范围，检测结果无明显差异，均可 准确快捷的对HBVDNA定量检测，为后续超敏定量工作奠定基础。 关键词 ：乙型肝炎病毒定量检测 ；实时荧光定量聚合酶链反应； RocheLightCycler@ 480II实时荧光定量 PCR仪； ABI7500型实时荧光定量PCR仪； 性能验证 ComparativeAnalysisofAHBVDNAQuantitativeDetectionReagent PerformanceValidation onDifferentDetectingPlatform LIYun—xia，WULan ，QIUFan (1．DepartmentofLaboratory，YongmeiGroupGeneralHospital，Shangqiu476600，China；2．MolecularDiagnosticLab，Departmentof NuclearMedicine，NanjingHospitalAffiliatedtoNanjingMdeicalUniversity／NanjingFirstHospital，Nanjing210006，China) Abstract：ObjectiveTocompareandvalidateSansureHBVDNAQunatitativeDetectionReagentondifferent detectingplatforms．M ethodsAccordingtotheEP seriesofdocumentissuedbyhteNationalCo