第二节 抗体.ppt

第三章 抗体 (Antibody) 抗体的分子结构 抗体的多样性 抗体的代谢 抗体产生学说的发展 免役球蛋白超家族 各类抗体的特性与免役生物学功能 抗体与免役球蛋白在概念上的区别 一、名词性质 抗体-免疫学,针对某种抗原 免役球蛋白-化学 二、分类 抗体-很多,复杂 免役球蛋白-按化学性质分为 IgG.IgM,IgA,IgD,IgE 三、 抗原有无 抗体-不存在没有抗原的抗体 免役球蛋白-不一定有抗原 四、提取方法 抗体-亲和层析 免役球蛋白-用化学方法 五、纯度 抗体-免役纯 免役球蛋白-化学纯 六、定量方法 抗体-免疫学(效价) 免役球蛋白-化学方法(蛋白质浓度) 七、特异性部位 抗体-Fab（可变区） 免疫球蛋白—Fc 八、多样性 抗体—大 免疫球蛋白—小 一、抗体的分子结构 单体分子结构 水解片段与生物学活性 免疫球蛋白的特殊分子结构 抗体（免疫球蛋白）分子的基本结构是如何确定的？ 1950s－1960s Rodney Porter Gerald Edelman Alfred Nisonoff 酶水解和还原 Porter and Edelman 用papain水解IgG Nissonoff 用Pepsin水解IgG 抗体与降解片段反应 抗Fab片段的抗体（可与轻链和重链结合） 抗Fc片段的抗体（只与重链结合） 免疫球蛋白氨基酸序列的确定 多发性骨髓瘤（multiple mycloma） 骨髓瘤蛋白（mycloma protein） 多发性骨髓瘤病人血清中的免疫球蛋白有95％是骨髓瘤蛋白；骨髓瘤细胞可以分泌大量的轻链，在骨髓瘤病人的尿中可以发现，称为Bence－Jones protein，动物也有多发性骨髓瘤，如小鼠的骨髓瘤细胞。 轻链的序列确定：Bence－Jones protein 重链的序列确定：用mercaptoethanol还原和alkylation骨髓瘤蛋白，再经层析分离获得重链。 1、单体分子结构 1.1、重链（heavy chain，H链） 氨基酸组成：420－440aa，分子量约50KD，两条重链之间由一对或一对以上的二硫键互相连接 可变区（variable region，VH） 恒变区（constrant region） 高变区（hypervariable region）－CDR 骨架区（framework region） 类型（class） 重链高变区的氨基酸残基位置 31－37aa 51－58aa 84－91aa 101－110aa 重链的类型 γ－IgG μ－IgG α－IgG ε－IgG δ－IgG 重链的类型决定免疫球蛋白（抗体）的种类 1.2 、轻链（light chain，L链） 氨基酸组成：213－214aa，分子量约为25KD。两条相同的轻链其羧基端（C）靠二硫键分别与两条重链连接 可变区（variable region，VL） 恒变区（constrant region，CL） 高变区（hypervariable region） 骨架区（framework region） 类型（type） 轻链高变区的氨基酸残基位置 26－32aa 48－55aa 90－95aa 轻链的类型 κ（kappa 型） λ（Lambda 型） 各类免疫球蛋白都有两型轻链分子 给类免疫球蛋白的轻链都是相同的 两型轻链的比较 1.3 免疫球蛋白的功能区（domain） VH－VL 抗体分子结合抗原的所在部位 CH1－CL 遗传标记所在 CH2 抗体分子的补体结合位点，与体 的活化有关 CH3 与抗体细胞的亲细胞性有关 铰链区（hinge region）CH1与CH2之间，30aa；与抗体分子的结构型变化有关 2、水解片段与生物学活性 2.1 Fab 片段 组成 由一条完整的轻链和N端1/2重链组成，分子量为45KD 生物学活性 结合抗原 决定抗体分子特异性的部位 2.2 Fc片段 组成 由重链C端1/2组成，包含CH2和CH3两个功能区，分子量为50KD 生物学活性 1.抗体分子选择性通过胚胎 2.补体的活化 3.决定抗体分子的亲细胞性 4.抗体分子通过粘膜进入外分泌液 5.决定各类 免疫球蛋白抗原特异性的部位 3、免疫球蛋白的特殊分子结构 3.1 连接链（joining chain，J 链） 为IgM和分泌型IgA所具有 分子