实验一、引言和实验室基础技术.ppt

实验1 实验室基础技术 一、实验目的： 以加强植物科学研究基本功的训练 培养科学研究的良好作风 二、实验内容： 掌握植物科学常规精密仪器的操作方法 一般的生物数据统计及图表制作技术 具体实验内容 （一）电子显示天平的使用 （二）可见分光光度计的使用 （三）加液的重现性（或精密度）和准确度 检验 （四）pH计的使用 （五）紫外分光光度计的使用 （六）科研论文中规范图表制作的一般要求 实验规范训练－量程的选择 天平 烧杯、量筒、容量瓶、试剂瓶－－不同规格 （二）可见分光光度计的使用 使用方法： （1）使用本仪器前，使用者应首先了解本仪器的基本结构和工作原理以及各操作旋钮的功能，在未接通电源之前，应检查电源线接线是否牢固，通地是否良好，各旋钮的位置是否正确，同时检查仪器底部的放大器和单色器的二个矽胶干燥筒，如受潮变色，应更换干燥的蓝色矽胶或倒出原矽胶，烘干后再用。 （2）在仪器尚未接通电源前，电表的指针必须位于“0”刻线上。 （3）将仪器的电源开关接通，打开比色皿暗厢盖。选择需用的单色光波长，调节“0”电位器使电表指“0”，然后将比色皿暗厢盖合上，比色皿处于蒸馏水校正位置，使光电管受光，调节“100%”电位器使电表指针到满刻度附近，仪器预热20分钟左右。 （4）放大器灵敏度有5档，是逐步增加的，“1”最低，其选择原则是保证能使空白档良好调到“100%”的情况下尽可能采用灵敏度较低档，这样仪器有更高的稳定性。所以，使用时一般置“1”档。灵敏度不够时再逐级升高，但改灵敏度后须按（3）重新调“0”和“100%”。 （5）预热后，按（3）连续几次调整“0”和“100%”，仪器即可进行测定工作。 （6）测定时，应先检查比色皿是否配套和洁净，杯间误差应尽量小，比色杯装液一般为杯体积的3/4-4/5，过多会溅出来，污染仪器，过少会影响测定数值。 （7）如果大幅度改变测试波长时，在调整“0”和“100%”后稍等片刻（因钨灯在急剧改变亮度后需要一段热平衡时间），当指针稳定后重新调整“0”和“100%”后即可工作。 具体内容： （1）顶部装载式（Sartorius MP8型）感量0.01克，最大称量1600克。随机选取生长一致的小麦苗4(?)株，洗净，吸去附着水分，分别称重，计算单株平均重和标准差（X?SD） （结论？）。 （2） Sartorius-GMDH: 感量0.0001克，最大称量160克。准确称取一定量（0.6585g??）的铁氰化钾, 配制100ml 0.02mol/L 铁氰化钾溶液（铁氰化钾的Mw=329.25）。 实验内容 （1）用下列不同类型的移液器，取1ml 0.02mol/L的铁氰化钾溶液至100ml容量瓶 中，混匀后定容。 （2）选择（二）2中铁氰化钾溶液的最大吸收波长(420 nm)，用可见分光光度计测量其光密度，至少重复3次。 （3）根据测定结果分别计算其平均值、标准差、变异系数和标准误等，制成三线表，并比较不同类型移液器加液的重现性和准确度（结论？）。 移液器类型：1、普通吸管； 2、胖肚吸管； 3、加样器(俗称“枪”)； 4、加液器。 实验内容 （1）以水为对照，取1ml 0.02 mol/L铁氰化钾溶液于100ml容量瓶中，定容至100ml。 （2）用9100型分光光度计测定该铁氰化钾溶液的吸收光谱，波长在420nm，记录结果。 补充资料 精密度（precision）和准确度（accuracy）不一样，回收率（recovery）与准确度也不一样。 以前曾经有把准确度叫做相对回收率的这种提法，但是现在准确度和回收率是分开算的。 精密度通常包括批（batch）内和批间，主要是指重复处理样品测定的重现性，以RSD考察。 （若确要区分二者：精密度通常指批（batch）内，重现性通常指批间的，都要求5次以上的重复，以RSD考察） 准确度是加标样品通过标准曲线回算的浓度与实际加标量的偏差来考察。 回收率是以加标样品与同浓度的标准品的响应信号（response，即峰面积）的比值来考察。 简单的统计学计算公式如下： 其中（4）、（5）较常用。 (6) 标准误 RSD即Relative Standard Deviation.叫相对标准偏差,也称变异系数(CV). RSD=标准差/平均值*100% 常用它表示精密度. . . . 标准偏差（SD）和标准误(SE)的区别联系 两者都是变异指标，但两者反映的总体不同。 标准偏差反映的是个体观察值间的变异， 标准误反映的是样本均数之间的变异（即样本均数的标准差，是描述均数抽样分布的离散程度及衡量