正常人眼角膜上皮细胞原子力显微镜观察.pdf

第 28卷 第 8期 分析测试学报 V0l_28No．8 2009年8月 FENXICESHIXUEBAO(JouuralofInstrumentalAnalysis) 88l～885 i研究报告i 0 ，．／ ＼!0，1．、鸯 正常人眼角膜上皮细胞的原子力显微镜观察 蔡小芳 ，杨筱曦 ，蔡继业 ，邓 华 (1．暨南大学 化学系，广东 广州 510632；2．暨南大学附属第一医院眼科，广东 广州 510632) 摘 要：应用原子力显微镜(AFM)在单细胞水平上分析了人眼角膜上皮细胞的形貌和机械性质，为进一步探 讨人眼角膜上皮细胞结构与功能的关系奠定了基础。将体外培养的人眼角膜上皮细胞用2．5％戊二醛固定， 空气中干燥后用原子力显微镜进行观察。从AFM形貌图可知 ，细胞呈长梭形 ，膜表面布满颗粒状物质 ，由 AFM附带软件 IP2．1的线分析及面分析功能，得到细胞膜表面结构的几何参数，包括高低差Rp—v、均方根粗 糙度 Rq、平均粗糙度Ra、平均高度MeantHt。利用AFM高空问分辨的力位移曲线测量系统，可得出细胞膜 的粘弹力、硬度和杨氏模量。ArM能对人眼角膜上皮细胞表面的超微结构清晰地成像并提供更多更确切的 表面信息 ，从另一层面增加对眼角膜上皮细胞的认识。 关键词：原子力显微镜 ；人眼角膜上皮细胞 ；形貌 ；粘弹力；硬度；杨氏模量 中图分类号：0766．1；Q246 文献标识码：A 文章编号：1004—4957(2009)08—0881—05 doi：10．3969／j．issn．1004—4957．2009．08．001 ObservationofHumanNormalEyeCornealEpithelia1CellbvAFM CAIXiao—fang ，YANGXiao—xi，CAIJi．ye ，DENG Hua (1．DepartmentofChemistry，JinanUniversity，Guangzhou 510632，China；2．DepartmentofOphthalmology， TheFirstAffiliatedHospital，JinanUniversity，Guangzhou 510632，China) Abstract：Themorphologyandmechanicalpropertyofhumannormaleyecornealepithelialcellwere analyzedbyatomicforcemicroscope(AFM)atsingle—cellleve1．Theseresultslaidafoundationfor detectingtherelationshipbetweenstructureandfunctionofthecel1．Thecellswerefixedwith2．5％ glutaraldehydeandair—dried．ThenthecellsweredetectedbyAFM with contactmode． Atleast20 cellswereobserved． Theimagesshowedthattheshapeofthecellspresentedlongfusiofmr andthere weregranularpackedparticlesonthecellmembrane．Thesizesoftheparticleswereabout100nm． Theseparticlesproducedby theaccumulation ofmembraneproteinsand lipopolysaccharides． With theregionanalysisfunctionofIP2．1software。theregionsof1Ixm ×1Ixm wereselectedandfourpa— rameterse．g．maximumpeak—to—valleydistance(Rp—v)，root-mean-squ